野生枝瑚菌多糖的提取、分離純化和抗氧化性研究.pdf

1、本文以野生枝瑚菌（Ramaria sp.）為研究對(duì)象，研究了野生枝瑚菌多糖的提取，分離純化以及多糖的抗氧化活性，為野生枝瑚菌多糖的利用與開(kāi)發(fā)提供參考。研究主要分四方面展開(kāi):野生枝瑚菌粗多糖的提取工藝優(yōu)化;多糖的分離純化;多糖的理化性質(zhì)和組成分析;多糖的抗氧化性研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)利用熱水浸提法提取野生枝瑚菌多糖，先通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，擇優(yōu)各個(gè)條件，再運(yùn)用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)來(lái)優(yōu)化。熱水浸提法最佳工藝條件為:提取溫度91℃，水料比32

2、∶1，提取時(shí)間3.2 h。按此條件提取野生枝瑚菌多糖得率為1.97％。
　　(2)采用Sevag法對(duì)提取的野生枝瑚菌多糖進(jìn)行脫蛋白處理，利用AB-8大孔吸附樹(shù)脂對(duì)多糖進(jìn)行脫色處理，透析后凍干得到較為純凈的多糖CRP。采用DEAE-52纖維素離子交換柱得到CRP-1、CRP-2、CRP-3三個(gè)組分，三個(gè)組分進(jìn)行葡聚糖凝膠G-100柱層析，得到RP-1、RP-2、RP-3，且它們都是單一對(duì)稱(chēng)峰，利用紫外光譜掃描及高效凝膠滲透色譜法進(jìn)行

3、鑒定，結(jié)果證明三個(gè)組分均為單一組分。
　　(3)利用溶解性、斐林試劑反應(yīng)等顏色反應(yīng)進(jìn)行多糖基本理化性質(zhì)測(cè)定，結(jié)果表明，RP-1、RP-2、RP-3具有多糖類(lèi)化合物的通性，不含蛋白質(zhì)和小分子低聚糖等雜質(zhì);通過(guò)高效凝膠滲透色譜法測(cè)多糖的分子量，結(jié)果表明多糖RP-1、RP-2、RP-3的相對(duì)分子量分別為1.38×104 Da，3098 Da，2285 Da;通過(guò)高效液相色譜法分析了它們的單糖組成及摩爾比，RP-1主要由甘露糖(78.48

4、％)組成，RP-2和RP-3的主要單糖組分是葡萄糖，分別為62.54％，58.06％，此外RP-2和RP-3還有甘露糖、核糖以及半乳糖等組分，以紅外光譜掃描分析了官能團(tuán)特征，三個(gè)組分的紅外光譜圖都具有多糖的特征吸收峰。
　　(4)以還原能力、總抗氧化能力、清除羥基自由基能力以及清除DPPH自由基能力為考察指標(biāo)，得出多糖CRP，純化多糖RP-2、RP-3具有良好的體外抗氧化活性，且還原能力、總抗氧化能力、清除羥基自由基能力以及清除D