吳茱萸生物堿的提取、純化、結(jié)構(gòu)及抗氧化性能的研究.pdf

1、吳茱萸（Evodia Rutaecarpa）為蕓香科（Rutaceae）吳茱萸屬植物。其藥用部分為成熟的果實，是一種常用中藥，具有散寒止痛，疏肝下氣，溫中燥濕之功效。本論文以吳茱萸為原料，對其中主要的活性成分生物堿進(jìn)行提取、分離、純化、結(jié)構(gòu)初步鑒定及功能方面研究。
　　 1吳茱萸生物堿提取工藝條件的優(yōu)化
　　 從乙醇、甲醇、乙酸乙酯3種溶劑中，選取乙醇為最佳提取溶劑。從冷漬法、超聲提取、熱回流、索氏提取4種常規(guī)提取吳茱萸

2、生物堿方法中，確定了效率最高的索氏提取為最佳提取方法。通過對提取次數(shù)的得率比較，確定只需提取1次即可。
　　 以原料目數(shù)、乙醇濃度、溶劑倍數(shù)和提取時間為影響因素，以吳茱萸堿和次堿得率為指標(biāo)，通過響應(yīng)面分析試驗結(jié)果可知，各因素中，乙醇濃度對得率的影響最大，依次是原料目數(shù)、提取時間和溶劑倍數(shù)。確定吳茱萸生物堿最佳提取條件為原料目數(shù)為40、提取時間為3.0h、溶劑倍數(shù)為31、乙醇濃度為72％，吳茱萸堿得率為8.90mg/g。
　

3、　 2吳茱萸生物堿的分離純化
　　 通過4種大孔吸附樹脂靜態(tài)吸附實驗得出，HPD450為最佳純化樹脂，乙醇為最佳的解吸溶劑。通過HPD450大孔吸附樹脂動態(tài)洗脫單因素實驗，得出動態(tài)洗脫的最佳條件：每克樹脂上樣2.4mg，1mL/min的吸附速率，pH值為9時，5BV的70％乙醇洗脫，1mL/min的解吸速率，初步純化效果較好。還從3種陽離子交換樹脂中選取D113進(jìn)行吸附研究，動態(tài)洗脫效果比大孔吸附樹脂稍好。再用葡聚糖凝膠LH-

4、20進(jìn)行分離，得到了吳茱萸堿和次堿單體，與一個混合組分。再通過結(jié)晶和薄層層析，對此混合組分進(jìn)行了進(jìn)一步分析。
　　 3吳茱萸生物堿的結(jié)構(gòu)分析
　　 采用紫外光譜和紅外光譜對吳茱萸生物堿進(jìn)行分析，找到了最大吸收峰和特征基團(tuán)。用高效液相色譜對吳茱萸生物堿進(jìn)行檢測，得到了適合混標(biāo)和單標(biāo)的流動相和儀器條件，吳茱萸生物堿純化產(chǎn)物中吳茱萸堿與次堿的含量分別為95.00mg/g和86.00mg/g。對純化所得樣品用液質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行分析，初

5、步斷定是5種喹諾酮類生物堿，其中4種已經(jīng)有文獻(xiàn)報道，另一種還需核磁共振等進(jìn)一步檢驗。
　　 4吳茱萸生物堿的抗氧化活性
　　 化學(xué)模擬體系實驗表明，吳茱萸生物堿的還原能力比抗壞血酸低，在0.005 mg/mL～0.2mg/mL，還原能力與濃度正相關(guān)。等濃度下吳茱萸生物堿清除羥基自由基的能力比抗壞血酸高，在0.2mg/L時清除率達(dá)到46％。吳茱萸生物堿清除超氧陰離子和清除二苯代苦味?；杂苫哪芰Χ急容^強，在0.05mg/