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文檔簡介
1、天然產物有效成分中的黃酮類化合物一直是天然藥化領域研究的熱點。本文以主要有效成分為黃酮類化合物的銀葉樹葉為原料,采用內部沸騰法對比其他不同的提取方法對其總黃酮進行了提取并對提取液進行純化,然后對純化后的銀葉樹葉總黃酮進行了抗氧化活性研究,為銀葉樹葉的進一步開發(fā)應用提供理論基礎。
在提取工藝中,主要采用酶提法和內部沸騰法提取銀葉樹葉總黃酮,對工藝條件進行優(yōu)化,并比較了內部沸騰法與醇提法及酶提法的提取效果,得出如下結論:
2、> (1)在單因素試驗的基礎上,采用正交設計試驗對纖維素酶提取工藝進行優(yōu)化,得到最優(yōu)工藝條件:纖維素酶濃度0.8 mg.mL-1,酶解溫度45℃,pH5.0,酶解時間90 min??傸S酮提取率為10.7%,總黃酮含量為43.8%。
(2)采用單因素試驗的方法,內部沸騰法得出最優(yōu)工藝條件:解吸劑濃度為80%的乙醇,解吸劑的量為3mL.g-1,解吸時間為20 min,提取劑濃度30%乙醇,提取劑用量為25 mL.g-1,
3、提取溫度為85℃,提取2次,每次5min。通過平行實驗驗證表明該工藝條件數據穩(wěn)定,具有可行性。在該條件下總黃酮提取得率為13.5%,提取物的黃酮含量達到46.9%。
(3)三種工藝比較結果:內部沸騰法的總黃酮提取率分別比醇提法及酶提法提高了4.8%和2.8%;浸膏中含量分別比醇提法及酶提法提高了14.5%和3.1%。
在分離純化工藝中,主要采用萃取分離法和大孔吸附樹脂分離法對內部沸騰法提取的黃酮類化合物進行純
4、化,以產物中的總黃酮含量及收率為指標,確定最優(yōu)純化工藝。研究表明:(1)選用正丁醇作為萃取劑,在無機鹽的協助下與提取液進行等體積萃取,得到總黃酮的含量和收率分別為64.4%和87.9%;(2)AB-8樹脂在最佳的純化工藝:常溫下,大孔樹脂2.0g,上樣質量濃度0.5 mg.mL-1,樣品液用量為26 mL,洗脫劑濃度為40%乙醇溶液,吸附流速為1 mL.min-1,洗脫流速為1 mL.min-1洗脫劑用量為30mL,得到樹脂的吸附量為6
5、.45 mg.g-1,解吸率為99.0%。在該工藝下分離純化銀葉樹葉總黃酮,得到黃酮含量為80.9%,回收率為92.8%。(3)對兩種純化方法的結果進行比較,AB-8大孔樹脂吸附純化銀葉樹葉總黃酮的效果更好。
選用豬油和食用油對純化后的銀葉樹葉總黃酮產物進行抗氧化活性研究,采用碘量法測定銀葉樹葉總黃酮對油脂過氧化值(POV)的影響。試驗結果表明:銀葉樹葉總黃酮對豬油和食用油均起到抗氧化作用,而且總黃酮含量越高,POV值越低
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