二甲雙胍干預(yù)大鼠激素性股骨頭壞死的實驗研究.pdf

1、目的：對激素性股骨頭壞死大鼠模型造模時同時給予二甲雙胍，探討使用二甲雙胍預(yù)防激素性股骨頭壞死的效果，為臨床長期或較大劑量使用激素可能發(fā)生股骨頭壞死的預(yù)防提供依據(jù)。
　　方法：將60只健康SD大鼠采取隨機(jī)數(shù)字表法分為A組（空白對照組）、B組（模型組）和C組（干預(yù)組），每組20只。B、C組大鼠肌注醋酸潑尼松龍24.5mg/kg，每周一次，持續(xù)12周;C組大鼠同時每日給予二甲雙胍0.2g/kg灌胃，A、B組大鼠每日給予生理鹽水2mL灌胃

2、，持續(xù)12周。實驗期間所有動物給予肌注硫酸慶大霉素5萬U/只，每周一次，以預(yù)防感染。在實驗12周，每只大鼠摘眼球法采靜脈血2mL，離心后收集上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血清中Ⅰ型前膠原N端肽(PINP)、骨特異性堿性磷酸酶(BALP)及β-骨膠原交聯(lián)(β-CTx)的含量。采血后每組隨機(jī)選取10只大鼠行18F-NaF Micro-PET顯像，通過比較標(biāo)準(zhǔn)化攝取值(SUV)，評估股骨頭局部的代謝情況。脊椎脫臼法處死所有動

3、物，取出雙側(cè)股骨頭，觀察比較標(biāo)本大體形態(tài)變化，10％福爾馬林固定，每組選取10個股骨頭行Micro-CT掃描，計算骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)(BV/TV、BS/BV、Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp及CWT)。所有標(biāo)本脫鈣后制作病理切片，HE染色行組織形態(tài)學(xué)觀察。實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物檢測

4、　　PINP：A組血清值為(258.45±57.34)ng/mL，B組為(336.31±38.66)ng/mL，C組為（381.76±33.08）ng/mL;B組較A組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，B組較C組含量更低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.011＜0.05)，C組較A組顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)。
　　BALP：A組血清值為（3.56±0.16）ug/L，B組為（3.83

5、±0.26）ug/L，C組為（4.21±0.23）ug/L;B組較A組升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，B組較C組含量更低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，C組較A組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003＜0.05)。
　　β-CTx：A組血清值為(35.96±4.84)pg/mL，B組為(46.08±4.35)pg/mL，C組為(38.94±4.69)pg/mL;B組較A組升高，差異具有統(tǒng)計

6、學(xué)意義（P=0.000＜0.05），B組較C組升高明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，C組較A組略升高，但兩者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.1＞0.05)。
　　2.Micro-PET/CT顯像結(jié)果
　　SUVmax：A組為（3.52±0.25），B組為(5.14±0.27)，C組為（6.69±0.36）;B組較A組增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，C組較A、B組增加明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

7、P=0.000＜0.05)。SUVmin：A組為（2.88±0.27），B組為（3.72±0.28），C組為（4.28±0.24）;B組較A組增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，C組較A、B兩組均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)。SUVmean：A組為（3.19±0.21），B組為（4.32±0.20），C組為（5.22±0.32）;B組較A組增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)，C組較A

8、、B兩組均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05)。
　　micro-CT掃描結(jié)果提示：A組骨小梁排列整齊，粗大，間隙小;B組骨小梁變細(xì)，間隙增寬，數(shù)目減少，斷裂較多;C組骨小梁較模型組粗，間隙較模型組小，數(shù)量多于模型組，無明顯斷裂。C組BS/BV較B組減小，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001＜0.05);C組Tb.Th較B組增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.01＜0.05）;C組Tb.N較B組增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0

9、.000＜0.05);B組Tb.N較A組減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000＜0.05);C組與A組間Tb.N差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.748＞0.05)。各組間BV/T、Tb.Sp和CWT差異較小，無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.組織形態(tài)學(xué)觀察
　　大體形態(tài)觀察：A組股骨頭軟骨完整，光滑，無變形塌陷;B組股骨頭表面色暗，光澤度差，存在小面積表淺軟骨破壞，部分股骨頭出現(xiàn)不同程度變形;C組股骨頭表面相對光滑，部分股骨

10、頭色暗，光澤度差，未見變形及塌陷。
　　組織學(xué)觀察：A組骨小梁排列規(guī)則，骨細(xì)胞清晰，細(xì)胞核大居中，偶見空骨陷窩，髓腔造血細(xì)胞豐富，有少許脂肪細(xì)胞，骨小梁周圍有較多成骨細(xì)胞。B組骨小梁排列稀疏，變細(xì)，結(jié)構(gòu)紊亂，存在較多斷裂，壞死骨細(xì)胞及空骨陷窩明顯增多，脂肪細(xì)胞布滿骨髓腔。C組骨小梁結(jié)構(gòu)相對完整而規(guī)則，空骨陷窩少，陷窩周圍成骨細(xì)胞散在分布，但空骨陷窩細(xì)胞數(shù)量明顯少于B組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：1.二甲雙胍能夠使激素性股骨