陸地棉重組自交系再生能力及相關基因的鑒定.pdf

1、棉花是主要的經濟作物，在分子生物學快速發(fā)展的今天，傳統(tǒng)的育種方法存在較多的局限性，因此結合體細胞胚胎再生技術獲得優(yōu)良轉基因品種已是大勢所趨。到目前為止，只有少數的棉花品種具備快速高效獲得再生植株的特性，而大部分栽培推廣品種不具備這一特性。棉花體細胞胚再生過程中，影響胚性愈傷的分化和植株再生的因素有很多，其中供體的基因型、培養(yǎng)基的類型是體胚發(fā)生中影響較大的因素。通過正向遺傳學的策略定位控制棉花體胚發(fā)生能力的位點，將控制高再生能力的基因從再

2、生能力高的品種轉移到再生能力低的品種中去，從而提高優(yōu)良品種的再生能力，以獲得高再生能力的優(yōu)良棉花品種。
　　本研究主要是以可快速獲得再生植株的棉花品種(YZ-1)和長江流域主栽培品種(Emian22)為親本，通過雜交后和多年的自交，構建的重組自交系群體，選取其中164個家系，采用IBA+KT(IK)和2，4-D+KT(DK)兩種不同激素組合的培養(yǎng)體系，分別對重組自交系群體YE的愈傷組織誘導率(CIF)、愈傷組織繼代繁殖力(CSC)

3、、愈傷組織的出胚率(CRE)以及愈傷組織出胚時間(CET)進行統(tǒng)計分析，以及對兩個體系下愈傷的顏色質地，培養(yǎng)流程進行對比分析。結果如下:
　　1.利用IK和DK體系對YE家系進行再生能力篩選，結合愈傷繼代繁殖力、胚性愈傷分化時間、分化率等數據，以及愈傷組織的顏色質地和不同體系下組織培養(yǎng)流程對比的綜合分析，結果表明IK培養(yǎng)體系比DK體系更適合YE家系的培養(yǎng)。
　　2.通過IK體系篩選得到36個可再生家系，DK體系篩選得到35個

4、可再生家系，共獲得46個可再生家系，兩個體系下都可再生的家系有25個，獲得31個可再生闊葉棉家系，得到16個再生能力接近YZ-1農藝性狀較好的闊葉棉家系，并獲得再生植株。
　　3.基于本實驗室構建的海陸種間高密度遺傳圖譜，以10cM遺傳距離挑選了494個覆蓋全基因組的標記，對每個培養(yǎng)體系篩選出的5個高再生能力家系材料進行全基因組背景檢測。通過對5個高再生能力材料的YZ-1等位基因的鑒定，將其具有YZ-1等位基因的位點作為可能控制再