BK通道基因敲除小鼠行為學評價及該通道與TRPV1通道在小鼠海馬神經(jīng)元中相互作用研究.pdf

1、目的：研究BK通道基因敲除小鼠的行為學表現(xiàn)，探究其在基礎水平與野生型小鼠的行為學差異。研究BK通道和TRPV1通道是否在小鼠海馬神經(jīng)元中形成復合體并在功能上相互偶聯(lián)從而調節(jié)神經(jīng)元的功能。
　　方法：觀察BK通道基因敲除小鼠的體型，稱量體重，對其進行自發(fā)活動、懸尾、強迫游泳、聽覺驚嚇反應的前脈沖抑制（prepulse inhibition，PPI）和轉棒實驗評估，與野生型小鼠的相關行為學指標進行比較。采用細胞免疫熒光染色法對原代培養(yǎng)

2、的小鼠海馬神經(jīng)元上BK通道和TRPV1通道的表達和分布情況進行檢測；以共轉野生型BK通道和TRPV1通道的HEK293T細胞裂解蛋白為陽性對照，通過免疫共沉淀的方法檢測小鼠海馬組織中的BK通道和TRPV1通道是否形成蛋白復合體；通過單細胞膜片鉗技術檢測原代培養(yǎng)小鼠海馬神經(jīng)元上BK通道和TRPV1通道之間的相互作用。
　　結果：BK通道基因敲除小鼠的體型較野生型小鼠小，體重較輕；自發(fā)活動增加且中間區(qū)域的時長增加，不容易產生焦慮樣癥狀

3、；在懸尾和強迫游泳實驗中的絕對不動時間較野生型小鼠短；其PPI值較野生型小鼠高；在轉棒上的時間明顯短于野生型小鼠，有運動協(xié)調能力障礙。BK通道和TRPV1通道在小鼠海馬神經(jīng)元細胞膜上共定位且二者形成蛋白復合物，TRPV1通道的特異性激動劑辣椒素可以激活小鼠海馬神經(jīng)元上的BK通道。
　　結論：和野生型小鼠相比，BK通道基因敲除小鼠體重較輕，不容易焦慮，不容易抑郁，PPI值升高，運行協(xié)調能力下降，有帕金森樣癥狀。BK通道和TRPV1通