基于卟啉的新型電致化學發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應用研究.pdf

1、電致化學發(fā)光(electrochemiluminescence，ECL)技術(shù)具有較好的可控性、選擇性、重現(xiàn)性及較高的檢測靈敏度，主要應用于臨床、農(nóng)業(yè)、環(huán)境和生物檢測等領(lǐng)域。
　　核酸是遺傳信息的攜帶者，在生命發(fā)展過程中具有重要意義。核酸適配體是能夠特異性結(jié)合某些小分子或蛋白的具有特殊結(jié)構(gòu)的核酸。核酸適配體在參與構(gòu)建生物傳感體系用于檢測某些特定蛋白或小分子的過程中發(fā)揮著重要的作用。卟啉(porphyrin)及金屬卟啉(metallo

2、porphyrin)因具有高度共軛的雜環(huán)結(jié)構(gòu)而具備良好的光電效應、電子傳輸和分離能力及電致化學發(fā)光活性。本論文主要研究基于卟啉的電致化學發(fā)光生物傳感器并研究其在核酸、蛋白質(zhì)檢測方面的應用。
　　1.基于卟啉超分子納米團簇電致化學發(fā)光的一種通用的DNA傳感策略
　　本實驗以H7N9病毒H7亞型的引物序列為檢測對象，用自行設計的發(fā)卡結(jié)構(gòu)DNA特異性捕獲目標DNA，發(fā)卡結(jié)構(gòu)打開后暴露的末端修飾基團為傳感體系構(gòu)建提供可能。根據(jù)金屬卟

3、啉可參與軸向配位的特點，利用富勒烯苯胺咪唑復合物富集ZnTPP合成了一種卟啉超分子納米團簇C60-ZnTPP復合物，并作為電致化學發(fā)光的信號分子。我們利用環(huán)糊精分子的中空桶狀結(jié)構(gòu)及其常作為物質(zhì)包絡主體的特性，將電致化學發(fā)光體組裝并固定在cDNA末端，構(gòu)建了基于電致化學發(fā)光的通用DNA傳感策略。經(jīng)電致化學發(fā)光分析檢測，本實驗發(fā)現(xiàn)，構(gòu)建的電致化學發(fā)光生物傳感體系能夠很好地檢測到目標DNA，檢測下限可達1.0pM。該體系使用通用、簡易的信號標

4、記、放大手段和DNA檢測策略，對核酸的靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢測下限低、線性范圍寬、穩(wěn)定性良好，具有廣闊的應用前景。
　　2.以溶菌酶和血紅素共觸發(fā)的適配體功能化量子點的特異性電致化學發(fā)光檢測平臺
　　本工作基于血紅素/G四鏈體復合物設計并構(gòu)建了一種高效快速的電致化學發(fā)光平臺用于檢測溶菌酶蛋白。利用吸附在殼聚糖上的納米金來固定末端為巰基的發(fā)卡結(jié)構(gòu)核酸適配體，該發(fā)卡結(jié)構(gòu)DNA由溶菌酶適配體和G四鏈體序列組成。在血紅素和溶菌酶同時