基于DNA適配體芯片上電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器的制備及應(yīng)用研究.pdf

1、適配體是經(jīng)過(guò)SELEX技術(shù)篩選合成出來(lái)的單鏈DNA或者RNA短鏈。由于適配體具有制備方便、穩(wěn)定性好、親和力強(qiáng)，且能高效、特異性的結(jié)合各種生物目標(biāo)分子，使其越來(lái)越受研究工作者的關(guān)注。近年來(lái)，DNA適配體已經(jīng)成為臨床、藥物、食品、衛(wèi)生及環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。
　　 量子點(diǎn)具有獨(dú)特的小尺寸效應(yīng)和熒光特性以及良好的生物兼容性，已被廣泛的應(yīng)用到各個(gè)領(lǐng)域。電致化學(xué)發(fā)光分析法(ECL)因不需要光源、背景干擾小、較高的靈敏度、較寬的線性范圍

2、以及良好的重現(xiàn)性和選擇性，使其逐漸成為分析檢測(cè)中的重要手段。這些技術(shù)的有效結(jié)合使得高靈敏度、高選擇性，甚至在線、實(shí)時(shí)、活體檢測(cè)等成為可能。本論文在上述基礎(chǔ)上開(kāi)展了以下研究工作：
　　 設(shè)計(jì)了一種新型、靈敏、簡(jiǎn)單、僅用一條適配體構(gòu)建的ATP三明治夾心型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器。首先在ITO電極上原位還原低表面密度的納米金，然后再組裝上適配體的一段斷鏈。利用適配體兩條斷鏈天然構(gòu)型之間的吸引來(lái)完成對(duì)目標(biāo)分子的識(shí)別。體系的ECL信號(hào)隨著A

3、TP的濃度增加而增大。依此建立的方法的線性范圍為0.2～100nmol/L。檢出限為0.02nmol/L。方法具有高選擇性和高靈敏度，適用于其它生物小分子。
　　 基于量子點(diǎn)芯片電致化學(xué)發(fā)光，構(gòu)建了一種新型的DNA適配體生物傳感器用于檢測(cè)凝血酶。首先刻蝕芯片電極，然后在ITO電極上原位合成納米金。然后通過(guò)巰基連接上凝血酶適配體，再通過(guò)溫育固定上凝血酶目標(biāo)物。而沒(méi)有結(jié)合凝血酶的DNA適配體與5'-生物素標(biāo)記的互補(bǔ)DNA低聚核苷酸(