鯰魚鰓中血管緊張素I轉(zhuǎn)換類似酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf

1、本研究以鯰魚的魚鰓為原料,從中分離純化出一種能降解血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶底物的蛋白酶,并對其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究,以期為魚鰓高值化利用提供依據(jù)。研究主要結(jié)果如下:
　　1、從草魚、鯉魚和鯰魚的魚鰓中提取可降解血管緊張素I底物的蛋白酶,發(fā)現(xiàn)鯰魚鰓中具有降解馬尿酰-組胺酰-亮氨酸(HHL)的血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶的類似酶(ACLE)。
　　2、通過硫酸銨沉淀法從鯰魚鰓水溶液中分離到的粗酶,經(jīng)過Toyopearl DEAE-650 M離子交換

2、柱層析、Cellufine GCL2000凝膠過濾柱層析以及RP-HPLC分離,分離的血管緊張素I轉(zhuǎn)換類似酶,其純化倍數(shù)為46倍,回收率為2.8％,酶活力為11.5 U/mg。SDS-PAGE確認(rèn)該酶的分子量約為50 KDa,與質(zhì)譜儀分析分子量為48808.9 Da的結(jié)果基本一致。
　　3、溫度、pH、金屬離子、酶抑制劑對所獲ACLE酶活的影響及米氏常數(shù)等酶學(xué)性質(zhì)分析的結(jié)果表明:蛋白酶的最適反應(yīng)溫度為40℃,在20-40℃之間穩(wěn)定