桑枝皮中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制物的分離純化及結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、我國是傳統(tǒng)的養(yǎng)蠶大國，具有豐富的桑樹資源。桑樹具有多種活性成分，如黃酮、生物堿、多糖等，屬傳統(tǒng)藥用植物。目前桑枝資源利用率還很低，除少部分用于食用菌培養(yǎng)基外，每年都有大量桑枝廢棄，并造成環(huán)境污染。充分開發(fā)利用桑枝資源，已受到人們的高度重視。本研究以桑枝皮為原料，利用超聲波輔助酶法提取具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（Angiotensin converting enzyme，ACE，EC3.4.15.1）抑制活性的化合物，并利用Plackett-B

2、urman(PB)試驗設(shè)計、最陡爬坡試驗和響應(yīng)面法優(yōu)化其提取工藝，通過離子交換樹脂、葡聚糖凝膠、高效液相色譜對抑制ACE活性化合物進行分離，并對其活性組分進行了初步分析。
　　本試驗以新鮮豬肺為原料，采用硫酸銨分級沉淀、葡聚糖凝膠G-100和纖維素DE-52分離純化后，經(jīng)SDS-PAGE檢測其純度，獲得ACE酶制劑純品，最終酶的比活力為699.53 U/mg，分子量為180kDa。
　　在PB試驗設(shè)計、最陡爬坡試驗基礎(chǔ)上，利

3、用響應(yīng)面分析法對桑枝皮中ACE抑制物提取工藝進行優(yōu)化，確定其最佳工藝條件為：桑枝皮料液質(zhì)量濃度64.6 g/L，纖維素酶加入量3454.3 U/g，超聲波功率87 W，提取時間68 min。在此條件下提取桑枝皮ACE抑制劑的抑制率可達到86％，其IC50值為2.19 g/L。桑枝皮提取殘渣的掃描電鏡結(jié)果表明，超聲波輔助酶法更有利于桑枝皮活性物質(zhì)的釋放，超聲波處理纖維素酶后，其活力提高了1.67倍；同時紫外光譜分析發(fā)現(xiàn)纖維素酶經(jīng)超聲波處理