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文檔簡介
1、Urocortin(Ucn)是促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(corticotropin-releasingfactor,CRF)肽類家族中的新成員。自從被發(fā)現(xiàn)以來,Ucn已被證實在心血管系統(tǒng)的功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用。但其作用機制至今仍不十分明確。 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin-convertingenzyme,ACE)是腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensinsystem,RAS)中的重要組成部分。AC
2、E通過將血管緊張素Ⅰ(angiotensinⅠ,AngⅠ)轉(zhuǎn)化為強縮血管物質(zhì)血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)及降解舒血管物質(zhì)緩激肽(bradykinin,BK)從而在血壓的調(diào)節(jié)方面起著極為重要的作用。 本研究探討了Ucn對于大鼠ACE活性及ACEmRNA表達的影響,進一步拓展對Ucn血壓調(diào)節(jié)作用機制的認識。 本研究內(nèi)容包括以下三部分,概述如下:1.急性給藥后Ucn對Sprague-Dawley(SD)大
3、鼠ACE水平及ACEmRNA表達的影響 采用尾靜脈注射給藥的方法,給予SD大鼠不同濃度的Ucn1小時后從胸主動脈取血測血清ACE水平;取大鼠胸主動脈及肺測定組織ACE水平。并應(yīng)用RT-PCR方法檢測組織ACEmRNA表達情況。 實驗結(jié)果顯示:Ucn可以濃度依賴性地降低血清ACE水平,而對組織ACE水平及組織ACEmRNA表達無明顯作用。且Ucn對血清ACE的作用被證明是通過CRF受體(CRFreceptor,CRFR)及
4、細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellularsignal-regulatedkinase1/2,ERK1/2)通路來發(fā)揮的。 2.亞急性給藥后Ucn對SD大鼠ACE水平及ACEmRNA表達的影響采用尾靜脈注射給藥的方法,連續(xù)給予SD大鼠不同濃度的Ucn3天后從胸主動脈取血測血清ACE水平;取大鼠胸主動脈及肺測定組織ACE水平。應(yīng)用RT-PCR方法檢測組織ACEmRNA表達情況。并采用原代培養(yǎng)的大鼠胸主動脈內(nèi)皮細胞(rat
5、aorticendothelialcells,RAECs),給予不同濃度的Ucn,孵育72h。應(yīng)用免疫熒光染色的方法,在激光共聚焦顯微鏡下觀測ACE熒光強弱并測定其熒光值(fluorescenceintensity,FI)。 實驗結(jié)果顯示:亞急性給藥后Ucn可以濃度依賴性地降低血清ACE水平,同時可以濃度依賴性地升高組織ACE水平及組織ACEmRNA表達。給予Ucn72h后,RAECs的ACEFI值明顯升高,且Ucn對RAECs
6、ACE含量的升高作用呈濃度依賴性。實驗進一步證明,亞急性給藥后Ucn對大鼠ACE的影響是通過CRFR及ERK1/2通路發(fā)揮作用的。 3.慢性給藥后Ucn對自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverats,SHR)ACE水平及ACEmRNA表達的影響 連續(xù)尾靜脈注射給予不同濃度的Ucn8周,每周測量1次SHR尾動脈收縮壓(systolicbloodpressure,SBP)。8周后,從胸主動脈取
7、血測血清ACE水平;取大鼠胸主動脈及肺測定組織ACE水平;并應(yīng)用RT-PCR方法檢測胸主動脈及肺ACEmRNA表達情況。 實驗結(jié)果顯示:慢性給藥后Ucn降低血清ACE水平,但可以濃度依賴性地升高胸主動脈及肺的ACE水平及組織ACEmRNA表達。同時,血清 ACE與SBP水平呈明顯正相關(guān)。 綜上所述,在體試驗及離體試驗均顯示,Ucn可以明顯影響大鼠ACE的水平,該影響是通過CRFR及ERK1/2通路發(fā)揮作用的。而給
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