聚多巴胺-水解聚(2-甲基-2-噁唑啉)毛細(xì)管涂層的制備及其在三聚氰胺檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、三聚氰胺原是常用的化工原料，因其含氮量較高(66％)，價(jià)格低廉，而被一些不法企業(yè)用作奶粉添加劑，以此造成奶粉中蛋白質(zhì)含量高的假象。三聚氰胺在人體內(nèi)水解成三聚氰酸，二者依靠氫鍵作用形成不溶于水的三聚氰胺氰尿酸鹽，造成輸尿管的阻塞，導(dǎo)致腎臟衰竭，甚至誘發(fā)膀胱癌。因此，為了確保食品安全，保證人們的健康，研究建立快速、高效、高靈敏度的檢測(cè)奶粉中三聚氰胺含量的方法，具有十分重要的實(shí)際意義和應(yīng)用價(jià)值。
　　目前用于檢測(cè)三聚氰胺的方法有氣相色譜

2、-質(zhì)譜法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)。GC法需要衍生化，過(guò)程比較繁瑣。HPLC法靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)，但樣品前處理步驟復(fù)雜且涉及大量有機(jī)溶劑。毛細(xì)管電泳(CE)由于具備分析速度快、分辨率高、樣品消耗量少等優(yōu)點(diǎn)，而被廣泛用于化工、環(huán)境、醫(yī)藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域。本論文采用聚多巴胺(PDA)輔助水解聚（2-甲基-2-噁唑啉）（即聚（2-甲基-2-噁唑啉-乙烯亞胺），PMOXA-EI）一步法共沉積涂層毛細(xì)管，結(jié)合紫外檢測(cè)器，定量分

3、析檢測(cè)奶粉中的三聚氰胺。本文主要包括以下幾個(gè)方面的工作:
　　首先考察了制備涂層毛細(xì)管所用多巴胺(DA)和PMOXA-EI的濃度、PMOXA的分子量和水解度對(duì)分離四種堿性混合蛋白（細(xì)胞色素c、溶菌酶、核糖核酸酶A和α-胰凝乳蛋白酶原A）的影響。當(dāng)DA濃度為6 mg/mL，PMOXA-EI的濃度為10 mg/mL時(shí)，PDA/PMOXA-EI涂層毛細(xì)管可實(shí)現(xiàn)對(duì)四種蛋白的基線分離;當(dāng)PMOXA分子量為1 kDa，水解度為0.4時(shí)，其與D

4、A共混涂層毛細(xì)管分離蛋白的效果最好。在一次涂層(PDA/PMOXA1k-EI0.4)的基礎(chǔ)上，我們制備了二次涂層(PDA/PMOXA1k-EI0.4+PMOXA1k-EI0.4)，二次涂層毛細(xì)管相比于一次涂層毛細(xì)管，蛋白質(zhì)分離效率更高。將PDA/PMOXA1k-EI0.4+PMOXA1k-EI0.4涂層毛細(xì)管用于檢測(cè)奶粉中的三聚氰胺，奶粉中可以檢測(cè)到三聚氰胺的最低量為4 mg/kg，三聚氰胺日內(nèi)和日間的加標(biāo)回收率分別為92.13％-10

5、2.47％和92.22％-100.30％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.07％-4.98％和2.43％-3.77％。PDA/PMOXA1k-EI0.4+PMOXA1k-EI0.4涂層毛細(xì)管在連續(xù)使用45天后，仍能用于奶粉中三聚氰胺的檢測(cè)，測(cè)得三聚氰胺的回收率為91.85％-106.14％。同時(shí)將本文所用CE法同國(guó)標(biāo)GB/T22388-2008中的HPLC法進(jìn)行了比較， HPLC法測(cè)定三聚氰胺的回收率為93.36％-100.13％，這與我們提出的