甲強龍與葛根素聯(lián)用在預(yù)防急性脊髓缺血再灌注損傷中的療效探討.pdf

1、背景:
　　 脊髓缺血再灌注損傷(spinal cord ischemic in-jury，SCII)是指當(dāng)脊髓受到一定的損傷因子攻擊時，脊髓神經(jīng)細(xì)胞會缺血一段時間，導(dǎo)致氧供應(yīng)不足，盡管后來血液重新灌注，但是卻引起了明顯的功能缺失，有時候甚至出現(xiàn)了遲發(fā)型神經(jīng)元死亡，這種死亡是不可逆轉(zhuǎn)的。在臨床的手術(shù)中，SCII一直是困擾臨床醫(yī)生的一大難題，而預(yù)防SCII的方法的研究也越來越重要。
　　 目前，甲強龍(MP)已被國內(nèi)外醫(yī)學(xué)

2、界認(rèn)為有確切療效并得到廣泛應(yīng)用的藥物。我們在脊髓手術(shù)之前使用大劑量MP沖擊治療來預(yù)防脊髓損傷，并已經(jīng)取得了確切的療效，病人脊髓損傷癥狀明顯減輕。
　　 通過對使用大劑量MP的病人的長期隨訪，我們發(fā)現(xiàn)，雖然病人脊髓損傷明顯減輕，但此類病人大劑量激素使用后的并發(fā)癥遠(yuǎn)較其他病人為高，同樣給病人造成了極大的痛苦。這給臨床醫(yī)生提出了新的難題。
　　 目前，使用何種方法在預(yù)防SCII的同時能夠盡可能地減少其并發(fā)癥已成為了醫(yī)學(xué)界新的研

3、究方向。這些年來，葛根素作為一種傳統(tǒng)中藥受到了越來越多的研究，以前的葛根素主要因其擴血管作用而在臨床使用，現(xiàn)在很多實驗都證明葛根素還有明顯的減輕SCII的作用，且作用較其它很多藥物明顯。本實驗采用成組設(shè)計的方法，觀察低劑量MP與葛根素聯(lián)用對SCII后脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的影響，以及功能學(xué)和組織學(xué)上的改變，通過與大劑量MP的對比，探討其對SCII的保護作用。
　　 目的:
　　 通過研究低劑量MP聯(lián)用葛根素與單用大劑量MP預(yù)防S

4、CII的療效的對比，為減少臨床激素的應(yīng)用提供依據(jù)。
　　 材料與方法:
　　 1、實驗動物及分組
　　 清潔SD大鼠80只隨機分為4組:空白組、模型組、陽性藥組、治療組，每組20只?？瞻捉M僅手術(shù)暴露腹主動脈[7];其它組均通過夾閉腎下腹主動脈30min[8]造成脊髓缺血再灌注損傷，陽性藥組于損傷前30min尾靜脈注射30mg/kg MP.治療組于損傷前30min尾靜脈注射10mg/KgMP并30mg/Kg的葛根素

5、，模型組于損傷前30min尾靜脈注射與MP組等容量的生理鹽水。
　　 2、模型制作及標(biāo)本制備
　　 10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉陽[9]。應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，找出左右腎動脈，然后于兩動脈之間夾閉腹主動脈30min后松開恢復(fù)血流?？瞻捉M于術(shù)后3h，后三組均于缺血再灌注后3h各取10只大鼠處死。取出腰段脊髓，勻漿后檢測SOD、Na-KATP酶表達水平?；謴?fù)血流灌注24 h以后，進行后肢運動功能評分，然后處死剩余

6、10大鼠，立即取出結(jié)扎部位以下脊髓，將其放置于4％多聚甲醛中固定。常規(guī)石蠟包埋、連續(xù)橫切片，行HE染色。
　　 3、觀察指標(biāo)與方法
　　 3.1、后肢神經(jīng)功能評分
　　 后肢神經(jīng)功能評分采用BBB評分標(biāo)準(zhǔn)[10]
　　 3.2、SOD、Na-KATP酶的檢測
　　 將提取的一段脊髓攪拌均勻，離心后取上清液，按試劑盒使用說明進行操作，測定最終反應(yīng)產(chǎn)物的吸光度。
　　 3.3、HE染色

7、　　 松開夾子24h后將動物處死，從背部結(jié)扎部位以下依次分離軟組織層，咬除棘突、椎板，取出脊髓，然后放入4％多聚甲醛中，12小時后行石蠟包埋切片，HE染色后光學(xué)顯微鏡下觀察。
　　 4、統(tǒng)計學(xué)處理
　　 用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件處理實驗數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)均用(x)±s表示，采用單因素方差分析四組間的整體差異，采用q檢驗比較組間兩兩差異，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、后肢功

8、能評分
　　 后肢運動功能顯示:與空白組相比，其它三組運動功能均明顯減低，其中陽性藥組、治療組評分明顯高于模型組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，陽性藥組和治療組之間進行比較，兩組之間沒有明顯差異(p＞0.05)。
　　 2、SOD、Na-KATP酶表達水平
　　 與空白組相比，再灌注3h后其他三組SOD、Na-KATP酶表達水平均明顯減低，但模型組表達水平低于陽性藥組、治療組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.

9、05)，陽性藥組和治療組進行比較，兩組之間SOD、Na-KATP酶均沒有明顯差(p＞0.05)。
　　 3、HE染色
　　 陽性藥組和治療組細(xì)胞損傷明顯低于模型組，陽性藥組和治療組未見明顯差異。
　　 結(jié)論:
　　 低劑量MP與葛根素聯(lián)用和大劑量MP都可以有效預(yù)防SCII，且兩者作用相當(dāng)，在以后的臨床手術(shù)中，我們完全可以使用低劑量MP與葛根素聯(lián)用取代目前的大劑量MP的應(yīng)用，從而大大減少了大量激素產(chǎn)生的副作