甲強龍預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的最佳用藥時間探討.pdf

1、在某些導(dǎo)致脊髓缺血因素去除,脊髓恢復(fù)血供后,卻出現(xiàn)了明顯的功能障礙,甚至出現(xiàn)不可逆性脊髓神經(jīng)元遲發(fā)性死亡,這種現(xiàn)象稱為脊髓缺血再灌注損傷。脊髓缺血再灌注損傷是臨床既常見又很難避免的棘手問題(如嚴重的脊髓型頸椎病,嚴重的黃韌帶、后縱韌帶骨化造成的胸椎管狹窄等手術(shù)減壓后的脊髓缺血再灌注損傷)。導(dǎo)致患者術(shù)后神經(jīng)癥狀加重,出現(xiàn)不全癱甚至全癱,給患者生理及心理帶來極大的痛苦,給家庭和社會帶來巨大負擔(dān)。熱休克蛋白27(Heat Shock Prot

2、ein27,HSP27)是一種作用廣泛的保護性蛋白,能提高細胞對不利環(huán)境的適應(yīng)性反應(yīng)。甲基強的松龍(Methylprednisolone,MP)是一種具有抗炎、抗氧化、減少細胞內(nèi)鈣離子的畜積、減少興奮性氨基酸釋放等作用的合成糖皮質(zhì)激素,其已經(jīng)在臨床應(yīng)用于預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷。有學(xué)者證實:在大鼠急性脊髓損傷模型中,甲基強的松龍可上調(diào)HSP27的表達。但預(yù)防應(yīng)用MP對缺血再灌注損傷局部脊髓組織中HSP27表達的影響尚未見報導(dǎo)。
　　

3、目的:制作大鼠脊髓缺血再灌注損傷動物模型,并在大鼠脊髓缺血再灌注損傷前30min、1h、3h三個不同的時間點,預(yù)防性應(yīng)用治療量(30mg/kg)的甲基強的松龍,觀察不同時間預(yù)防應(yīng)用甲基強的松龍后,脊髓缺血再灌注損傷局部HSP27表達的變化。來探討甲基強的松龍預(yù)防脊髓缺血再灌注損傷的最佳用藥時間,并闡明其可能的機制。
　　方法:實驗中總計使用SD大鼠75只,隨機分為A、B、C、D、E組,每組15只。A組為假手術(shù)組,僅暴露腹主動脈,而

4、不做其它處理;B組為模型對照組;C組、D組、E組為三個實驗組。B、C、D、E組均通過夾閉腹主動脈造成脊髓缺血再灌注損傷,C、D、E組分別于損傷前30min、1h、3h尾靜脈注射30mg/kg甲基強的松龍,B組于損傷前30min尾靜脈注射與治療組等量的生理鹽水,作為對照治療。損傷后3h取脊髓標(biāo)本。行HE染色,觀察損傷局部神經(jīng)元胞體、胞核、核仁的形態(tài);神經(jīng)元的極性;和尼氏體的染色情況,了解損傷后組織的病理變化;以免疫組化染色檢測HSP27表

5、達,觀察HSP27表達的部位和強弱。使用計算機圖像分析的方法測量HSP27染色陽性物質(zhì)的吸光度A,A反應(yīng)染色強度,代表HSP27相對含量。數(shù)據(jù)結(jié)果應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行處理。
　　結(jié)果:HE染色可見,實驗組B神經(jīng)元胞體萎縮,胞核、核仁、尼氏體均顯示不清,極性消失。實驗組C胞體萎縮較組B明顯減輕,可以觀察到胞核和核仁,極性存在,尼氏體顯示欠均勻。實驗組D胞體萎縮較重,個別神經(jīng)元內(nèi)無法分辨胞核、核仁,極性不明顯,尼氏體染色

6、不均勻。實驗組E與實驗組B未見明顯差別。五個實驗組的HSP27染色陽性物質(zhì)平均吸光度值A(chǔ)((?)±s×400)分別為:63.76±3.02、100.32±4.13、132.05±5.03、121.92±4.68、102.16±5.96。試驗組C、實驗組D HSP27表達均較模型組增強(P<0.05),且試驗組C、試驗D組間差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),試驗組E和實驗組B HSP27表達差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究發(fā)

7、現(xiàn),在脊髓缺血再灌注損傷前特定時間點預(yù)防使用甲基強的松龍,能上調(diào)缺血再灌注損傷局部脊髓組織中HSP27的表達,且在HSP27表達增強的同時,伴隨著神經(jīng)細胞病理改變的減輕。這提示,甲基強的松龍預(yù)處理有減輕脊髓缺血再灌注損傷的作用,促使HSP27表達的上調(diào)可能是甲基強的松龍在脊髓缺血再灌注損傷中起保護作用的機制之一。同時,于再灌注損傷前30min、1b、3h三個不同的時間點采用甲基強的松龍預(yù)處理,其減輕脊髓損傷病理改變和上調(diào)HSP27表達的