結合位點確定的高分子雜化體的制備及其功能研究.pdf

1、蛋白質由于本身的低溶解性、低生物藥用率和低穩(wěn)定性限制了它的臨床醫(yī)療應用，而將聚合物以共價鍵的方式接枝到蛋白質上形成聚合物-蛋白質雜化體，這種雜化體同時具備了聚合物和蛋白質的雙重性質，使蛋白質具有穩(wěn)定性、良好的溶解性、生物相容性及克服了蛋白質原有的應用局限性，除此之外，這些雜化體還能夠發(fā)生自組裝、相行為轉變以及調節(jié)蛋白質應用范圍。蛋白質雜化體廣泛地應用到蛋白質納米技術、催化劑技術、生物工程以及藥物緩釋領域。
　　溫敏型聚合物在受到溫

2、度變化刺激時能夠發(fā)生相形態(tài)轉變行為。這種溫敏型聚合物接枝蛋白質形成的雜化體會引起蛋白質溫度響應性，這為生物蛋白醫(yī)藥緩釋，生物蛋白溫敏開關，以及生物蛋白的分離提供了廣闊的前景。本文主要研究了典型溫敏型單體N,N-二乙基丙烯酰胺（DEAAm）的原子轉移自由基聚合（ATRP）以及將聚合物PDEAAm接枝牛血清白蛋白（BSA）形成雜化體的制備和應用。本文主要由三部分組成：
　　第一章本章主要介紹了“智能”高分子的科學領域，首先，我們對各種

3、“智能”高分子做了響應原理的解釋以及它的合成和應用；接著我們對聚合物與蛋白質形成雜化體的“Grafting-to”、“Grafting-from”和“Grafting-through”三種接枝的方法和Iniferter、NMP、ATRP和RAFT四種活性自由基形成蛋白質雜化體的合成以及應用做了介紹。
　　第二章以接枝牛血清白蛋白賴氨酸殘基第34位的巰基為目標，以2,2'-二吡啶基二硫醚、巰基乙醇、2,2-雙(羥甲基)丙酸及2-溴代

4、異丁酰溴為原料合成了含有二硫吡啶官能團的鏈狀引發(fā)劑（L-DPSBr）和雙臂引發(fā)劑（T-DPSBr），再以氯化亞銅（CuCl(I)）為催化劑，以N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三胺（PMDETA)為配體對單體N,N-二乙基丙烯酰胺（DEAAm）做了原子轉移自由基聚合（ATRP），并考察了在不同的反應加料比、配體、時間、溫度以及不同比例的甲醇/水混合溶劑下，對所得聚合物PDEAAm的產率，分子量及分散度的影響。采用1H-NMR和

5、gPC對所得聚合物做了表征，得出了最佳條件下所得聚合物分子量較大以及分散度較窄。
　　第三章采用“grafting to”技術將鏈狀L-PDEAAm1和雙臂狀T-PDEAAm兩種聚合物通過牛血清白蛋白賴氨酸殘基第34位的巰基反應接枝到BSA上分別形成鏈狀和雙臂狀兩種高分子雜化體，并對這些雜化體通過基質輔助激光解吸電離離子源（MALDI）和飛行時間質量分析器（TOF）檢測了其分子量的變化，再利用變性電泳（SDS-PAGE）和非變性電