植物源益生菌增菌物質(zhì)的研究.pdf

1、益生菌的數(shù)量是衡量益生菌產(chǎn)品好壞的一個重要指標，如何選取益生菌的增菌物質(zhì)并使其活性增加，成為了國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點。本課題選用常見的植物源（18種藥食同源物、13種水果、9種蔬菜）作為益生菌的增菌培養(yǎng)基，研究植物源對益生菌增殖及發(fā)酵活力的影響，以及蔬菜組合發(fā)酵過程中功能性成分和亞硝酸鹽含量的變化，并選用7L全自動發(fā)酵罐發(fā)酵，建立益生菌菌體動力學(xué)模型，通過冷凍干燥技術(shù)獲得植物源益生菌粉，為確定益生菌的增菌物質(zhì)及果蔬發(fā)酵制品的原料配方提供實

2、驗依據(jù)。研究結(jié)果表明:
　　藥食同源物對益生菌生長的影響。18種藥食同源物作為增菌培養(yǎng)基進行單因素實驗，8種藥食同源物能夠明顯促進益生菌生長;通過單純重心設(shè)計實驗進一步優(yōu)化得到培養(yǎng)基組合:薏苡仁5.507％、蓮子30.834％、麥芽20.545％、山藥15.129％、葛根4.739％、百合15.259％、桑椹6.321％、大棗1.666％，活菌數(shù)達到3.89×108cfu/mL;選用10種益生菌進行驗證，其中植物乳桿菌、鼠李糖乳桿

3、菌、羅伊氏乳桿菌在穩(wěn)定期時生長情況最好，均能達到1×109cfu/mL以上，保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、副干酪乳桿菌、干酪乳桿菌在穩(wěn)定期時生長情況較好，活菌數(shù)在1×108～9×108cfu/mL內(nèi)，乳雙歧桿菌、糞鏈球菌、嗜熱鏈球菌在穩(wěn)定期時生長情況一般，活菌數(shù)在1×107～9×107cfu/mL內(nèi)。
　　水果對益生菌生長的影響。13種水果作為增菌培養(yǎng)基進行單因素實驗，8種水果能夠明顯促進益生菌生長;通過單純重心設(shè)計實驗進一步優(yōu)化得

4、到培養(yǎng)基組合:荸薺16.67％、梨8.34％、西瓜4.33％、甜瓜13.13％、圣女果14.36％、蘋果7.96％、橘子19.34％、洋生姜15.88％，活菌數(shù)達到9.93×108cfu/mL;選用10種益生菌進行驗證，其中嗜酸乳桿菌、保加利亞乳桿菌、鼠李糖乳桿菌在穩(wěn)定期時生長情況最好，均能達到1×109cfu/mL以上，干酪乳桿菌、羅伊氏乳桿菌在穩(wěn)定期時生長情況較好，活菌數(shù)在1×108～9×108cfu/mL內(nèi)，植物乳桿菌、副干酪乳桿

5、菌、糞鏈球菌在穩(wěn)定期時生長情況一般，活菌數(shù)在1×107～9×107cfu/mL內(nèi)，嗜熱鏈球菌、乳雙歧桿菌在穩(wěn)定期時生長情況較差，活菌數(shù)在1×106～9×107cfu/mL。
　　蔬菜源益生菌增菌物質(zhì)的研究和作用機理。
　　1)蔬菜對益生菌生長的影響。根據(jù)實驗室前期的工作，通過混料設(shè)計實驗優(yōu)化得到培養(yǎng)基組合:黃瓜17.33％，胡蘿卜5％，山藥5％，白蘿卜46.736％，蓮花白5％，小白菜5％，小青菜5％，油麥菜4.999％，芹

6、菜5.935％，活菌數(shù)達到9.14×108cfu/mL;選用10株益生菌進行驗證，其中，嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌和羅伊氏乳桿菌在穩(wěn)定期生長最好，活菌數(shù)達到109cfu/mL，保加利亞乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌和鼠李糖乳桿菌在穩(wěn)定期時生長情況較好，活菌數(shù)均在5×108～9.9×108cfu/mL，嗜熱鏈球菌和糞鏈球菌生長情況較差，活菌數(shù)為107cfu/mL，乳雙歧桿菌在穩(wěn)定期時生長情況最差，活菌數(shù)在1×106～9×106cfu/mL之

7、間。
　　2)蔬菜發(fā)酵過程中功能性成分的研究。選用增菌效果明顯的7株益生菌在蔬菜培養(yǎng)基中發(fā)酵，結(jié)果表明:LB、LP、LC、LCP、LA、LAR和LR的活菌數(shù)都達到108cfu/mL，接入不同益生菌發(fā)酵24h時，pH值在3.2左右，酸度在0.4％～0.8％之間，LCP和LA在發(fā)酵過程中產(chǎn)生SOD酶，活力最終達到189.09U/mL;不接菌時，發(fā)酵40h出現(xiàn)亞硝酸峰，亞硝酸鹽含量達到19.40mg/kg，分別接入益生菌，整個發(fā)酵過程中

8、亞硝酸鹽含量低于10mg/kg，隨著發(fā)酵時間的延長，亞硝酸鹽的含量逐漸降低，最終低于0.2mg/kg;通過繪制VB1、VB2、VB6的線性回歸方程，得到蔬菜培養(yǎng)基提取液樣品中VB1的濃度為10.8mg/L，VB2的濃度為42mg/L，VB6的濃度為2.97mg/L。
　　3)蔬菜培養(yǎng)益生菌菌體動力學(xué)模型的建立。保加利亞乳桿菌動力學(xué)模型:X=0.05502496 e0.24193t/9.44864+0.00582 e0.24193t

9、
　　植物源益生菌粉的制備研究。在前期實驗的基礎(chǔ)上，通過混料設(shè)計實驗優(yōu)化得到植物源培養(yǎng)基組合:黃瓜15.078％，白蘿卜8.519％，薏苡仁11.234％，蓮子13.66％，荸薺11.168％，甜瓜40.342％，活菌數(shù)達到1.0×1010cfu/mL;選用保加利亞乳桿菌進行驗證，繪制生長曲線，0h～4h為調(diào)整期，4h～48h為對數(shù)期，培養(yǎng)到48h活菌數(shù)達到9.52×109cfu/mL，在混合植物源培養(yǎng)基中連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)4次后活菌數(shù)