黃粉蟲抗菌物質(zhì)的提取、活性測(cè)定及應(yīng)用研究.pdf

1、為了給黃粉蟲抗菌物質(zhì)的開發(fā)利用提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)，本論文測(cè)定了黃粉蟲幼蟲和成蟲產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對(duì)常見的病原細(xì)菌和真菌的抑制作用效果，初步研究了其抑菌作用機(jī)制，同時(shí)研究了這些抗菌物質(zhì)對(duì)果品的防腐應(yīng)用。獲得的主要結(jié)果如下：
　　 1.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的提取
　　 通過(guò)10種不同溶劑：甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚、丙酮、苯等對(duì)黃粉蟲幼蟲勻漿物進(jìn)行浸泡提取，用提取物對(duì)大腸桿菌進(jìn)行抗菌試驗(yàn)，篩選出打孔加樣抑菌圈法作為最佳測(cè)定方

2、法，乙酸乙酯為最佳提取溶劑。用4種不同的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)黃粉蟲幼蟲產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，最終確定最佳誘導(dǎo)方法為菌液注射法（誘導(dǎo)后飼養(yǎng)48h）。對(duì)黃粉蟲幼蟲和成蟲體內(nèi)的抗菌物質(zhì)進(jìn)行誘導(dǎo)，用乙酸乙酯提取，利用硅膠柱層析法對(duì)粗提物進(jìn)行分離。
　　 2.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的抗細(xì)菌、真菌活性
　　 利用打孔加樣抑菌圈法檢測(cè)幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對(duì)4種細(xì)菌的抗菌活性，利用生長(zhǎng)速率法測(cè)定抗菌物質(zhì)對(duì)5種病原真菌的抗菌活性。結(jié)果表明：兩類蟲體的抗菌物質(zhì)對(duì)所測(cè)

3、4種細(xì)菌（包括革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌）均有顯著的抑菌效果：其中黃粉蟲幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對(duì)大腸桿菌的抑制效果均強(qiáng)于氨芐青霉素(100mg/mL)，且誘導(dǎo)后幼蟲抗菌物質(zhì)對(duì)大腸桿菌的抑制效果略強(qiáng)于成蟲，抑菌圈直徑約為27.40mm（含加樣孔直徑）?？咕镔|(zhì)對(duì)大腸桿菌均有較好的抑菌作用，且熱穩(wěn)定性較好。MIC檢測(cè)結(jié)果表明幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)經(jīng)0.05％吐溫-20溶液稀釋后對(duì)大腸桿菌的MIC最低為6.25mg/mL，對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC最低

4、為12.5mg/mL;且幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)的0.05％吐溫-20稀釋液在最小抑菌濃度時(shí)對(duì)這兩種菌有抑菌作用。通過(guò)對(duì)黃粉蟲抗菌物質(zhì)對(duì)大腸桿菌致死曲線的測(cè)定，結(jié)果表明抗菌物質(zhì)對(duì)大腸桿菌不是抑菌作用，而是殺菌作用。
　　 黃粉蟲幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)對(duì)5種受試的果蔬病原真菌均有顯著的抑菌效果：200mg/mL抗菌物質(zhì)對(duì)番茄枯萎病菌的體外抑制效果最好（幼蟲抗菌物質(zhì)菌絲生長(zhǎng)抑制率為62.34％，成蟲為60.61％），對(duì)蘋果炭疽病菌的體外抑制效

5、果最差（幼蟲抗菌物質(zhì)菌絲生長(zhǎng)抑制率為29.55％，成蟲為27.27％）；并且抗菌物質(zhì)對(duì)番茄枯萎病菌是致死效應(yīng)，在接觸6d和12d后轉(zhuǎn)移，7d后含200mg/mL的黃粉蟲抗菌物質(zhì)的平板上仍未見番茄枯萎病菌有生長(zhǎng)現(xiàn)象。
　　 3.黃粉蟲抗菌物質(zhì)的防腐應(yīng)用
　　 用不同濃度的黃粉蟲抗菌物質(zhì)，通過(guò)損傷接種的方式對(duì)4種果蔬病原真菌進(jìn)行體內(nèi)抑制作用實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：抗菌物質(zhì)對(duì)蘋果炭疽病害、梨黑星病害、棗炭疽病害和番茄枯萎病害有明顯的抑

6、制作用，在三種不同濃度下均能降低果蔬的腐爛率，幼蟲和成蟲抗菌物質(zhì)濃度為200mg/mL時(shí)，番茄腐爛率（與無(wú)菌水相比）分別下降了34.97％、31.31％，效果最明顯。與體外抑制作用效果相比，體內(nèi)抑制作用的效果雖然有所降低，但直接證明了黃粉蟲抗菌物質(zhì)對(duì)果蔬病害有抑制作用。
　　 黃粉蟲抗菌物質(zhì)的防腐應(yīng)用試驗(yàn)結(jié)果表明：抗菌物質(zhì)對(duì)番茄的整果保鮮效果較明顯，保鮮時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)30d;抗菌物質(zhì)和熱水浸果結(jié)合使用，對(duì)番茄整果保鮮效果更好，保鮮