基于nanoLC-MS-MS的細胞凋亡多肽組學和水稻多肽組學研究.pdf

1、多肽組學自誕生以來受到廣泛的關(guān)注。多肽組學關(guān)注的是生物體內(nèi)產(chǎn)生的具有一定功能的小分子多肽。本研究利用定量多肽組學技術(shù)研究細胞凋亡過程，并對植物生長階段產(chǎn)生的多肽進行了初步研究。
　　細胞凋亡是根據(jù)質(zhì)膜的完整性定義的一種生理性的死亡，它可以保護局部的炎癥反應(yīng)和組織損傷。目前關(guān)于細胞凋亡與癌癥發(fā)生、各種免疫性疾病之間的關(guān)系有著很多的研究。近年來已有一些基于蛋白質(zhì)組學的細胞凋亡研究。為了更清楚地了解細胞凋亡過程中多肽含量的變化及這些多肽

2、可能參與的過程或功能，我們利用定量多肽組學對凋亡過程進行了研究。本研究以Hela細胞系作為實驗材料，用不同濃度的H2O2對其進行處理，提取凋亡過程產(chǎn)生的多肽并進行定量分析。主要結(jié)果如下：
　　1. CCK-8法檢測了H2O2對Hela細胞的毒性，發(fā)現(xiàn)藥物對細胞的影響不僅與作用濃度和作用時間有關(guān)，還與細胞的數(shù)量有關(guān)。用不同濃度H2O2處理Hela細胞6小時，采用Annexin V-FITC/PI雙染法定量檢測細胞調(diào)亡情況。當細胞量達

3、到3.5×107個，5 mM H2O2處理細胞6小時后，細胞凋亡率為40％，此時細胞多處于凋亡后期。
　　2.比較2 mM或5 mM H2O2處理細胞6小時的定量多肽組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該凋亡過程共檢測出385個多肽，這些多肽的前體蛋白中共93個表達差異顯著，這93個多肽蛋白前體與蛋白質(zhì)代謝、凋亡過程、細胞周期等有關(guān)。僅30個多肽是蛋白質(zhì)中間片段，其他的多肽主要分布在C-端或N-端。
　　植物活性多肽在植物的生長發(fā)育及抗病抗蟲過程中