香菇柄中水溶性蛋白及活性肽的研究.pdf

1、香菇(Lentinus edodes)，是一種營(yíng)養(yǎng)豐富的優(yōu)質(zhì)食用菌，富含蛋白質(zhì)、多糖、礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成分，且具有一定的保健作用。目前對(duì)于香菇的研究主要集中在香菇多糖方面，對(duì)香菇蛋白的研究甚少，而對(duì)于香菇加工的下腳料-香菇柄的深加工很少有人研究，寶貴資源未能合理利用。本研究表明，香菇柄與香菇蓋中的化學(xué)成分有很多相似之處，有一定的開(kāi)發(fā)價(jià)值。本文針對(duì)目前國(guó)內(nèi)對(duì)香菇柄深度開(kāi)發(fā)較少的現(xiàn)狀，以香菇柄為原材料，研究其中水溶性蛋白、多肽和膳食纖維的提

2、取和加工，以期為香菇產(chǎn)業(yè)的無(wú)廢渣排放提供一些理論依據(jù)。本文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　1.研究了在弱堿環(huán)境下提取香菇柄水溶性蛋白的最佳工藝，并測(cè)定了該蛋白的等電點(diǎn)與分子量。結(jié)果表明：香菇柄水溶性蛋白的最佳提取條件為料液比1:28，提取時(shí)間6h，提取溫度24℃，PH8.5；此條件下，水溶性蛋白的提取率可達(dá)到菇柄總蛋白的52.8％，相對(duì)于干香菇的得率的10.3%。SDS–PAGE電泳分析表明：在該條件下得到的水溶性蛋白質(zhì)分子量大都

3、集中于40~50ku左右，該水溶性蛋白的等電點(diǎn)結(jié)果為pH4.3，與大多植物蛋白的等電點(diǎn)接近。
　　提完水溶性蛋白后的菇柄渣滓經(jīng)過(guò)二次酶解和乙醇沉淀，制備出了菇柄膳食纖維。該香菇柄膳食纖維的純度為72.4%，相對(duì)于香菇柄殘?jiān)牡寐蕿?1.2%。
　　2.本研究以香菇柄水溶性蛋白為材料，經(jīng)過(guò)不同蛋白酶水解制備出不同的多肽溶液；以脂肪酶抑制率和多肽得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，從不同香菇柄多肽溶液種篩選出一種脂肪酶抑制率和多肽得率都相對(duì)較高的多

4、肽，通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)該多肽酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化；然后采用G50凝膠色譜對(duì)最佳工藝條件下制備的菇柄多肽進(jìn)行分子量分布分析。結(jié)果表明：最佳蛋白酶為高溫堿性蛋白酶和中性蛋白酶X，高溫堿性蛋白酶的最佳水解條件為： pH8.5，溫度50℃，時(shí)間60min；中性蛋白酶X的最佳水解條件為：加酶量3000U/g，pH6.2，溫度48℃，時(shí)間75min；G50分析顯示，高溫堿性蛋白酶酶解香菇柄多肽和中性蛋白酶X酶解多肽的分子量均主要集中在5KD

5、a以下，分別占總多肽的87%和83%左右，香菇柄高溫堿性蛋白酶活性肽和中性蛋白酶X多肽的體外脂肪酶抑制率分別為32.4%和27.6%。該研究結(jié)果已申報(bào)發(fā)明專(zhuān)利。
　　3.以肥胖模型小鼠為試驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行的以上兩種活性肽的減肥試驗(yàn)表明，多肽劑量組小鼠的血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平與模型組相比均有顯著性下降（P＜0.05），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）也均有提高；活性肽多肽組小鼠的體重凈增率、脂肪墊重量和脂體比相比模型組