Cobratoxin鎮(zhèn)痛及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本實驗旨在研究泰國眼鏡蛇長鏈神經(jīng)毒素cobratoxin的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制。
　　 方法：用熱板法、von Frey法、福爾馬林法、醋酸扭體法等行為學(xué)方法研究鞘內(nèi)注射泰國眼鏡蛇長鏈神經(jīng)毒素cobratoxin對小鼠急性痛的鎮(zhèn)痛作用。建立大鼠坐骨神經(jīng)部分結(jié)扎(PSNL)的神經(jīng)病理性疼痛模型，采用壓爪-縮腿法和輻射熱-縮腿法測定動物的機(jī)械痛閾和熱痛閾；觀察鞘內(nèi)注射cobratoxin后PSNL大鼠痛覺過敏的變化；運用免疫組織化

2、學(xué)，檢測PSNL大鼠脊髓背角c-fos表達(dá)，計數(shù)Fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞；用藥理學(xué)方法觀察M4亞型毒蕈堿型膽堿受體(mAChR)拮抗劑托吡卡胺(tropicamide)和α7煙堿型膽堿受體(nAChR)拮抗劑甲基牛扁亭堿(methyllycaconitine，MLA)是否能翻轉(zhuǎn)cobratoxin的鎮(zhèn)痛作用，以探討其相關(guān)機(jī)制。
　　 結(jié)果：⑴鞘內(nèi)注射cobratoxin(5μg/kg)對小鼠由熱、機(jī)械和化學(xué)刺激引起的多種急性痛都具

3、有鎮(zhèn)痛作用；而且，這種鎮(zhèn)痛可以被靜脈注射M4受體拮抗劑托吡卡胺所阻斷。⑵PSNL大鼠術(shù)后第7天痛閾明顯降低，出現(xiàn)機(jī)械痛敏和熱痛敏；脊髓背角c-fos表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.01)，神經(jīng)元處于激活狀態(tài)。⑶PSNL大鼠鞘內(nèi)注射不同劑量的cobratoxin(0.56μg/kg，1.12μg/kg，4.5μg/kg)對機(jī)械痛敏具有劑量依賴性的抑制作用，脊髓背角c-fos表達(dá)也明顯減少(P<0.001)。⑷PSNL大鼠鞘內(nèi)注射M4受體拮抗劑托吡卡