HIF-1a在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌胰島素抵抗中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌中的表達(dá)和意義。
　　 方法:18條健康雜種犬,隨機(jī)分成空白組(不阻斷主動(dòng)脈)、模型組和DMOG組(后兩組主動(dòng)脈均阻斷60min)。分別于轉(zhuǎn)流前、開放主動(dòng)脈時(shí)、開放主動(dòng)脈后15min、60min、120min取左鎖骨下動(dòng)脈、冠狀靜脈竇血和左室心尖部心肌組織。隨后利用氧化酶法測定血漿葡萄糖、計(jì)算心肌葡萄糖凈攝取量和葡萄糖凈取率;放射免疫法測定胰島素、胰高血糖素;

2、乳酸酶法測定血漿乳酸濃度;氣相色譜法測定血漿游離脂肪酸濃度;從而比較不同的時(shí)間點(diǎn)的胰島素抵抗(IR)相關(guān)指標(biāo)的變化,并監(jiān)測圍手術(shù)期血流動(dòng)力學(xué)變化;取左心室心尖部心肌組織用免疫組化SP法檢測心肌HIF-1α蛋白,RealTimeRT-PCR法檢測心肌HIF-1αmRNA表達(dá),圖象分析系統(tǒng)分析HIF-1α蛋白表達(dá)量的變化。
　　 結(jié)果:1.心肌葡萄糖代謝:心肌缺血再灌注后,模型組和DMOG組的血漿葡萄糖較空白組和CPB轉(zhuǎn)流前均不同程

3、度明顯增高,于再灌注15～60min達(dá)峰值(與空白組相比較,P＜0.05或P＜0.01;與轉(zhuǎn)流前比較,P＜0.05或P＜0.01),同時(shí)心肌對(duì)葡萄糖的攝取、利用嚴(yán)重障礙。與DMOG組比較,模型組的血漿葡萄糖增高程度更重、持續(xù)更久(兩組間差異顯著,P＜0.05或P＜0.01)。心肌葡萄糖凈攝取量及心肌葡萄糖凈攝取率于CPB缺血再灌注后15min均為零,隨后再灌注60～120min后模型組、DMOG組對(duì)葡萄糖的利用有不同程度恢復(fù),但均未恢復(fù)

4、至轉(zhuǎn)流前水平。同時(shí)與DMOG組相比較,模型組攝取量及攝取率恢復(fù)更慢、持續(xù)更久(兩組間差異顯著,P＜0.05)。體外循環(huán)心肌缺血再灌注15min至120min期間,模型組和DMOG組的胰島素抵抗指數(shù)較空白組和CPB轉(zhuǎn)流前均不同程度明顯升高,此后明顯降低,但均未恢復(fù)至轉(zhuǎn)流前水平(與空白組相比較P＜0.01;與轉(zhuǎn)流前相比P＜0.05或P＜0.01);同時(shí)與DMOG組相比較,模型組的胰島素抵抗指數(shù)升高更明顯,更顯著,恢復(fù)更慢(兩組間相比較差異顯

5、著,P＜0.01)。2.血漿胰島素、胰高血糖素、乳酸、游離脂肪酸:心肌缺血再灌注后,模型組和DMOG組的血漿胰島素、胰高血糖素、乳酸、游離脂肪酸濃度較空白組和CPB轉(zhuǎn)流前均不同程度明顯增高,在主動(dòng)脈開放15min至30min期間達(dá)峰值,此后逐漸降低,至開放120min均未恢復(fù)至轉(zhuǎn)流前水平(與空白組相比,P＜0.05或P＜0.01;與轉(zhuǎn)流前相比,P＜0.05或P＜0.01)。同時(shí)與DMOG組相比較,模型組升高程度更重、恢復(fù)更慢、持續(xù)更久(

6、兩組間差異顯著,P＜0.05或P＜0.01);3心肌HIF-1α蛋白及總mRNA表達(dá)量:心肌缺血再灌注后,模型組和DMOG組的心肌HIF-1α蛋白及總mRNA表達(dá)較空白組和CPB轉(zhuǎn)流前均不同程度明顯上升,在缺血再灌注15min最明顯(與空白組相比,P＜0.01;與轉(zhuǎn)流前相比,P＜0.05或P＜0.01)。同時(shí)與DMOG組相比較,再灌注后模型組的心肌HIF-1α蛋白的表達(dá)量在再灌注15min表達(dá)量低于該組,但隨著時(shí)間推移其表達(dá)量和上升幅度

7、漸漸高于該組;一直至再灌注120min,與DMOG組相比較,模型組的HIF-1α蛋白表達(dá)量上升更為明顯,持續(xù)時(shí)間更長(兩組間相比較差異顯著,P＜0.05或P＜0.01)。4.心功能情況:體外循環(huán)心肌缺血再灌注15min,模型組和DMOG組的LVSP和±dp/dtmax均明顯降低,LVEDP均明顯升高,此后逐漸恢復(fù),但均未恢復(fù)至轉(zhuǎn)流前水平(與空白組相比,P＜0.05或P＜0.01;與轉(zhuǎn)流前相比,P＜0.05或P＜0.01);同時(shí)與DMOG