PI3K在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌胰島素抵抗發(fā)生機制中的作用.pdf

1、目的：檢測在體外循環(huán)（CPB）缺血再灌注心肌胰島素抵抗過程中磷脂?；?-激酶（PI3K）的表達，了解心肌細胞是否通過PI3K來誘導葡萄糖轉運蛋白-4（Glut-4）的轉運，進一步探討體外循環(huán)心肌胰島素抵抗的受體后發(fā)生機制。
　　 方法：健康雜種犬24條，隨機分為四組，組Ⅰ（n=6）主動脈阻斷30min；組Ⅱ（n=6）主動脈阻斷120分鐘；組Ⅲ（n=6）主動脈阻斷30min+胰島素（PI3K激活劑）；組Ⅳ（n=6）主動脈阻斷30

2、min+渥曼青霉素（PI3K抑制劑）。分別于CPB轉流前、開放主動脈后15min、45min、75min時同時采集動脈、冠狀靜脈竇血標本與心肌組織標本。應用放射免疫法檢測并比較各組血標本葡萄糖、胰島素，比較相應時間點血漿葡萄糖、胰島素、胰島素抵抗指數(shù)（IRI）的變化。用PCR技術測定PI3K表達；在相應時點取到的左心室心肌用免疫組化技術檢測心肌細胞包膜及胞漿Glut-4的變化。
　　 結果：1.心肌葡萄糖代謝：缺血再灌注后血漿葡

3、萄糖較轉流前不同程度明顯增高，于再灌注15min達峰值（P<0.05）。與組Ⅰ比較，組Ⅱ再灌注后血漿葡萄糖增高明顯（P<0.05）；組Ⅳ血漿葡萄糖增高程度更重、持續(xù)更久（P<0.01）。2.胰島素抵抗指數(shù)：四組體外循環(huán)期間IRI均明顯上升，在缺血再灌注后15min達到峰值，并且75min仍持續(xù)較高水平，與轉流前比較，差異有顯著性（P<0.01）。與組Ⅰ比較，組Ⅱ和組Ⅳ更重、恢復更慢、持續(xù)更久（P<0.05）；3.心功能情況：心肌缺血再灌

4、注后15min各組左室收縮壓（INSP）和左室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）均明顯降低，左室舒張末壓（LVEDP）均明顯升高（P<0.01），此后逐漸恢復。與組Ⅰ比較，組Ⅱ再灌注后變化明顯，恢復減慢。與組Ⅲ比較，組ⅣINSP及±dp/dtmax下降更明顯，LVEDP升高更顯著（P<0.01）。4.心肌細胞Glut-4外膜百分比：與轉流前比較，于再灌注15min，組Ⅰ～Ⅲ外膜百分比值下降達低谷（P<0.01），于再灌注75min有

5、不同程度緩慢上升；而組ⅣGlut4外膜百分比值持續(xù)減低，于再灌注75min達低谷（P<0.01），與組Ⅰ比較，再灌注后組Ⅱ外膜百分比值下降明顯，持續(xù)時間長（P<0.05）。與組Ⅲ相比較，組Ⅳ再灌注后外膜百分比值下降更明顯，持續(xù)時間更長（P<0.01）。5.PI3K表達變化：缺血再灌注后心肌細胞PI3K表達均不同程度下降；與組Ⅰ比較，組ⅣPI3K表達下降明顯（P<0.01），而組ⅢPI3K表達增強（P<0.05）。
　　 結論：C