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文檔簡介
1、磷酸鹽既參與微生物細(xì)胞組成如磷脂、核酸以及多種輔酶的合成,同時還在核心糖代謝途徑EMP和HMP中發(fā)揮重要作用,因此,監(jiān)控微生物細(xì)胞的磷代謝對微生物細(xì)胞生長與控制、代謝與代謝調(diào)控等方面具有重要意義,并有助于相關(guān)發(fā)酵過程控制新方法的建立提供新的依據(jù)。為此,本研究首先建立起磷酸鹽的快速檢測方法,并以此初步解析發(fā)酵過程中磷酸鹽消耗與菌體生長、產(chǎn)物合成之間的關(guān)系,主要結(jié)果如下:
通過對磷酸鹽快速檢測操作參數(shù)的研究,優(yōu)化了磷酸鹽快速定量測
2、定方法,在此基礎(chǔ)上組建磷酸鹽快速檢測試劑盒,考察了本試劑盒的使用方法、儲存方法、測定pH以及測定溫度。試劑盒檢測的定量下限為9.75×10-8mol L-1,檢測誤差為1~3.2%,最適測定pH范圍為4.5~7.6。對復(fù)雜樣本與處理方法進(jìn)行了研究,獲得樣本預(yù)處理方法為:(1)待測樣品與等體積的2mol L-1 NaOH溶液混合,靜置10min;(2)在60℃條件下,向其中加入1/2體積的1mol L-1 HCl,使沉淀消失;(3)再向其
3、中加入2倍體積的無水乙醇,靜置10min,12000r min-1離心5min,取上清。
運(yùn)用本磷酸鹽定量測定試劑盒,對多種常見培養(yǎng)基原料(包括酵母粉、蛋白胨和玉米漿粉等)以及多種微生物(如大腸桿菌、地衣芽胞桿菌和黑曲霉等)發(fā)酵過程中的磷酸鹽含量進(jìn)行了定量分析,所測得結(jié)果與用國標(biāo)方法獲得的結(jié)果一致。
以重組大腸桿菌42-0#為研究對象,研究了發(fā)酵過程中磷酸鹽含量變化規(guī)律,解析了大腸桿菌生長和產(chǎn)酶過程與磷酸鹽消耗間的相
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