心室閾下電刺激對大鼠急性心肌缺血再灌注損傷影響的研究.pdf

1、目的：
　　恢復(fù)血供是目前治療缺血性心臟病的重要途徑，而心肌缺血再灌注（I/R）損傷也成為主要并發(fā)癥和難題。閾下電刺激作為一種安全有效的治療手段已經(jīng)在很多領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用，但其對心肌I/R損傷的影響還鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察心室閾下電刺激對大鼠急性心肌I/R損傷引起的血流動(dòng)力學(xué)、心律失常、梗死面積、凋亡程度等指標(biāo)的影響，評價(jià)其對I/R心肌的作用，并進(jìn)一步從連接蛋白43（Cx43）、P物質(zhì)（SP）、降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）、N

2、F-κB和Caspase-3活性等幾方面深入探討可能的機(jī)制。
　　方法：
　　成年雄性SD大鼠(350±20g)以結(jié)扎冠脈方法建立急性心肌I/R模型。心室電刺激強(qiáng)度為不引起室早的最大閾下強(qiáng)度，頻率為動(dòng)物自身心率65％-70%。動(dòng)物隨機(jī)分成4組(每組n=6)：①正常對照組：直接開胸取心肌標(biāo)本；② I/R組：缺血30min+再灌注60min；③電刺激預(yù)處理組：結(jié)扎冠脈（CAO）前15min開始持續(xù)電刺激直到再灌注結(jié)束；○4電刺激

3、后處理組：CAO25min開始電刺激，直到再灌注結(jié)束。收集血流動(dòng)力學(xué)（收縮壓、舒張壓、平均壓和心率）和室性心律失常（室早、室速、室顫）數(shù)據(jù)。用伊文氏藍(lán)-TTC雙染法評價(jià)心梗面積，用TUNEL法和Caspase-3活性檢測心肌凋亡并計(jì)算凋亡率(AR)。用ELISA法檢測心肌Cx43、SP、CGRP蛋白水平，同時(shí)用qRT-PCR法檢測心肌SP、CGRP、NF-κB的mRNA水平。
　　結(jié)果：
　　電刺激（預(yù)/后處理）并不會(huì)顯著影

4、響I/R組的死亡率、血流動(dòng)力學(xué)或心律失常指標(biāo)(p>0.05)，但可以顯著限制I/R組梗死面積和凋亡率(all p<0.05)，后處理顯著下調(diào)了I/R組NF-κB、SP的mRNA水平和Caspase-3活性(all p<0.05)。與正常組相比，I/R組心肌Cx43蛋白水平、Cx43側(cè)面化程度顯著增高(all p<0.05)；而電刺激（預(yù)/后處理）可以顯著逆轉(zhuǎn)這種趨勢(all p<0.05)，電刺激預(yù)處理和后處理之間差別并不顯著(p>0.