牡蠣提取物中營養(yǎng)成分的分析及有效部位篩選.pdf

1、本論文內(nèi)容主要包括牡蠣及其提取物的營養(yǎng)分析和牡蠣有效部位的活性篩選兩部分。
　　第一部分,牡蠣及其提取物的營養(yǎng)分析。
　　新鮮牡蠣肉在室溫下加水提取,過濾后繼續(xù)加入3％醋酸溶液提取。對(duì)牡蠣肉及其提物液Oy0、Oy1、Oy2進(jìn)行營養(yǎng)分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Oy1、Oy2中蛋白質(zhì)含量較高,分別為33%和53%,氨基酸種類豐富,其中以3%稀醋酸為提取液所得的蛋白質(zhì)和氨基酸含量較高。
　　將提取液Oy0、Oy1、Oy2用乙醇分級(jí)沉淀

2、,經(jīng)紫外掃描后合并譜圖相似的組分,并標(biāo)記為A-H。對(duì)乙醇沉淀后的剩余物進(jìn)行營養(yǎng)分析,結(jié)果表明Oy0′中K、Mg、Ca、Zn等元素含量豐富,Oy1′中含有豐富的K、Mg、Ca、Cu、Fe、Zn、Ni等元素,Oy2′中K、Mg、Ca、Mn、Zn等元素含量較高。經(jīng)正常小鼠餐后血糖實(shí)驗(yàn)篩選發(fā)現(xiàn)組分B、D、F有降糖活性,對(duì)其進(jìn)行氨基酸和糖原含量檢測(cè),結(jié)果表明組分B的主要成分為蛋白質(zhì)和糖原,組分D的主要成分為蛋白質(zhì),組分F中糖原、蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽含量

3、較高,由此可見它們發(fā)揮生理活性可能為其中一種成分起作用或幾者成分的相互作用。
　　第二部分,牡蠣有效部位的活性篩選。
　　建立動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?給予不同部位的牡蠣提取物,通過指標(biāo)檢測(cè)及臟器病理切片觀察,探討牡蠣提取物的治療效果,篩選有效活性部位。
　　1.降血糖實(shí)驗(yàn)
　　(1)對(duì)組分A、B、C、D、E、F通過正常小鼠餐后血糖實(shí)驗(yàn)進(jìn)行篩選,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明組分B、D、F在200mg/kg時(shí)對(duì)正常小鼠餐后30min內(nèi)的血糖有

4、一定的抑制作用。(2)通過腹腔注射四氧嘧啶溶液誘導(dǎo)高血糖模型小鼠,給予模型小鼠高、低劑量的組分B、D、F(各600mg/kg、400mg/kg)和陽性藥優(yōu)降糖(100mg/kg),持續(xù)3周。檢測(cè)各組2周及3周后小鼠空腹血糖,發(fā)現(xiàn)B低劑量(400mg/kg)能明顯降低模型小鼠血糖,且具有顯著性差異(P<0.05);與模型組相比,B低劑量組(400mg/kg)的肝體比、腎體比均明顯降低(P<0.01),但脾體比無顯著性差異,表明牡蠣提取物組

5、分B具有一定的保肝功能,并對(duì)腎臟功能有一定的促進(jìn)作用;觀察胰腺病理切片,發(fā)現(xiàn)B低劑量(400mg/kg)對(duì)β細(xì)胞有一定的恢復(fù)和保護(hù)作用,并對(duì)胰島有一定的修復(fù)作用。
　　2.降血脂實(shí)驗(yàn)
　　喂食特殊加工的高脂飼料12周建立高血脂癥大鼠模型,建模成功后給予模型大鼠組分B、D、F、G(均400mg/kg)和陽性藥辛伐他汀(1mg/kg)。灌胃5周后檢測(cè)血脂四項(xiàng)指標(biāo),計(jì)算臟器指數(shù),并制備肝臟病理切片。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,B組及辛伐他汀組與

6、模型組比較,指標(biāo)TG具有顯著性差異(P<0.05),且分別下降了35.2%及44.4%;B組能輕度減輕大鼠肝臟的重量,但是對(duì)腎臟、脾臟重量變化無影響;觀察肝臟病理切片,B組胞質(zhì)內(nèi)脂肪空泡的數(shù)量相對(duì)于模型組有一定的減少,介于模型組與陽性組之間,表明組分B能夠降低高血脂癥大鼠血漿中TG水平并對(duì)肝臟的脂肪病變有一定的治療作用。
　　3.酒精性肝損傷實(shí)驗(yàn)
　　灌胃56度白酒(12mL/kg/d)建立酒精性肝損傷模型,預(yù)防中劑量組給予

7、組分F(300mg/kg),建模7周后分別給予組分F高、中、低劑量(450mg/kg、300mg/kg、150mg/kg)和陽性藥多烯磷脂酰膽堿(50mg/kg)。5周后檢測(cè)血清指標(biāo),計(jì)算臟器指數(shù),并制備肝臟病理切片。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,血脂指標(biāo)TG,F治療中劑量組(300mg/kg)在灌胃后,與模型組相比具有極顯著性差異(P<0.01),且下降49.2%;,F預(yù)防中劑量組(300mg/kg)在灌胃前后,與模型組相比均有顯著性差異((P<0.