硒酵母高產菌株的篩選及發(fā)酵條件的研究.pdf

1、硒(Selenium)是一種生物體所必需的微量營養(yǎng)元素，具有諸多的生物學作用，而且硒是谷胱甘肽過氧化酶不可缺少的活性組成部分，可以保護生物膜的通透性，從而抑制一些人類常見病的發(fā)生。然而目前人體內的硒含量都處于缺乏狀態(tài)，大多數情況下，天然食品中的硒含量也普遍很低，如果僅僅依靠天然食物來補充硒，這一途徑是遠不能滿足人體正常需求的。
　　 酵母因為其生長速度快，培養(yǎng)方便，富含高蛋白、豐富的B族維生素和一些對人體有益的礦物質，成為了最廣

2、泛最安全的營養(yǎng)微生物，漸漸的走進了人們的視線。對于一些微量營養(yǎng)元素，酵母還具有很強的富集作用，更能將有毒無機硒轉化為被人體吸收的有機硒，與其他的一些無機硒相比，富硒酵母存在以下幾點優(yōu)勢:1.利用率高;2.毒性低;3.營養(yǎng)價值高;4.硒含量高;5.生理活性高。因此利用酵母來富集硒是一個安全又高效的辦法，所以富硒酵母漸漸成為了目前科研中的研究熱點之一。
　　 本研究以實驗室保存的命名為Y1的釀酒酵母（Saccharomycescer

3、evisiae）為實驗材料，經紫外線和亞硝酸復合誘變后，選育出了一株富硒能力強、菌體生物量高的突變菌株，同時確定出富硒酵母的最佳培養(yǎng)條件。
　　 1.將酵母細胞懸浮液經1mL0.1mol/L的NaNO2溶液和7mLpH4.4HAc-NaAc緩沖液處理14min后，在紫外線下照射8min，得到突變株Y12的生物量和硒含量最高，其菌體生物量由原來的8.83g/L提高到12.10g/L，硒含量由原來的611μg/g提高到832μg/g

4、。
　　 2.對篩選出的高產Y12突變菌株進行五次傳代培養(yǎng)后，沒有發(fā)生回復突變，證明經復合誘變后的菌株遺傳穩(wěn)定。
　　 3.對不同類型的培養(yǎng)基進行篩選，同時對培養(yǎng)基成分中碳、氮源和無機鹽的種類進行優(yōu)化，最終確定了最佳的培養(yǎng)基成分:麥芽浸粉1％、蔗糖2％、蛋白胨1％、尿素1％、KH2PO40.05％、MgSO40.1％。此條件下得到的菌體生物量為17.65g/L，硒含量為931μg/g。
　　 4.在單因素實驗中，