非標(biāo)記型電化學(xué)核酸適配體生物傳感器的研究.pdf

1、核酸適配體是通過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)篩選出來的,能夠與目標(biāo)靶分子高效特異性結(jié)合的單鏈DNA或RNA寡聚核苷酸,相較于抗體有許多優(yōu)勢。近年來,基于核酸適配體和目標(biāo)靶分子之間的特異性結(jié)合的生物傳感技術(shù)受到了越來越廣泛的關(guān)注。其中,非標(biāo)記型核酸適配體生物傳感器以其信號(hào)強(qiáng),成本低的優(yōu)勢成為研究重點(diǎn)。
　　本論文以凝血酶和腺苷為主要研究模型,以聚硫堇和鐵氰化物為氧化還原探針,以各自的核酸適配體為目標(biāo)分子識(shí)別元件,構(gòu)建非標(biāo)記型電化學(xué)核酸適

2、配體生物傳感器,并對其性質(zhì)和應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)研究探討。具體內(nèi)容如下:
　　(1)在玻碳電極表面以電聚合法制備了聚硫堇氧化還原電化學(xué)探針,以金納米粒子為固定核酸適配體的載體,構(gòu)建了非標(biāo)記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學(xué)阻抗譜對傳感器的組裝過程進(jìn)行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對傳感器的電化學(xué)行為進(jìn)行了研究。該傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~500 ng/mL范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.998,檢測限為0.3

3、8 pg/mL(S/N=3)。該傳感器對腺苷的檢測在10 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9986,檢測限為3.8 pg/mL(S/N=3)。
　　(2)在玻碳電極表面以電沉積法制備了鐵氰化物氧化還原電化學(xué)探針,以金納米粒子為固定核酸適配體的載體,構(gòu)建了非標(biāo)記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學(xué)阻抗譜對傳感器的組裝過程進(jìn)行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對傳感器的電化學(xué)行為進(jìn)行了研究。以鐵氰化鈷

4、為探針的傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.998,檢測限為0.28 pg/mL(S/N=3)。以鐵氰化鎳為探針的傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.998,檢測限為0.24 pg/mL(S/N=3)。
　　(3)在玻碳電極表面先電沉積一層納米金,增強(qiáng)修飾電極的電子傳遞性能,隨后電沉積鐵氰化鎳氧化還原電化學(xué)探針,

5、以金納米粒子為固定凝血酶核酸適配體的載體,使凝血酶適配體組裝到電極上,再通過互補(bǔ)鏈雜交組裝腺苷適配體,成功構(gòu)建了既可以檢測凝血酶又可以檢測腺苷的非標(biāo)記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學(xué)阻抗譜對傳感器的組裝過程進(jìn)行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對該傳感器的電化學(xué)行為進(jìn)行了研究。該傳感器對凝血酶的檢測在1.0 fg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.996,檢測限為0.27 fg/mL(S/N=3)。該傳感器