PET活體內(nèi)顯像腦AchE活性-顯像藥物[11C]MP4A的合成、生物學(xué)評(píng)價(jià)及其動(dòng)物PET顯像方法的建立.pdf

1、第一部分
　　 乙酰膽堿酯酶活性的PET顯像劑-[11C]MP4A的制備
　　 目的:合成能反映腦乙酰膽堿酯酶活性的PET顯像劑[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶(11C]MP4A)的前體4-乙酰氧基哌啶(P4A);制備[11C]MP4A。方法:合成前體P4A。利用[11C]碘代甲烷合成模塊合成的[11C]碘代甲烷([11C]CH3I)直接與P4A反應(yīng)制備[11C]MP4A,或?qū)11C]CH3I通過(guò)三氟甲基磺酸銀柱轉(zhuǎn)

2、化為[11C]-三氟甲基磺酸甲烷([11C]-Triflate-CH4)后再與P4A反應(yīng)制備[11C]MP4A。結(jié)果:P4A化學(xué)純度達(dá)99％以上。采用[11C]-Triflate-CH3制備的[11C]MP4A放化純＞98％,轟擊結(jié)束后(EOB)放射合成時(shí)間為20分鐘,校正衰變后產(chǎn)率為40％-55％。
　　 結(jié)論:采用[11C]-Triflate-CH3制備的[11C]MP4A放化純度高,產(chǎn)率高。
　　 第二部分

3、　　 腦乙酰膽堿酯酶活性的PET顯像劑-[11C]MP4A在大鼠體內(nèi)分布的研究
　　 目的:研究腦乙酰膽堿酯酶活性的正電子斷層掃描(PET)診斷顯像劑[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶([11C]MP4A)在大鼠體內(nèi)的攝取和分布。方法:正常雌性SD大鼠按注射后5、15、25、35、45、60分鐘時(shí)間點(diǎn)分組,尾靜脈注射[11C]MP4A后斷頭處死動(dòng)物,迅速取血,分離臟器和腦(大腦皮層、小腦和腦干),用自動(dòng)γ放射性計(jì)數(shù)儀測(cè)定11

4、C計(jì)數(shù)后稱重。計(jì)算經(jīng)衰變校正后不同時(shí)間點(diǎn)各臟器放射性攝取率,以％ID/g表示。結(jié)果:一次劑量的[11C]MP4A靜脈注射后,血中的放射性活性在5分鐘時(shí)％ID/g為13.44±1.88,清除迅速,60分鐘時(shí)接近于基線水平。各臟器組織[11C]MP4A的攝取15-25分鐘達(dá)到穩(wěn)態(tài)。注射[11C]MP4A5分鐘時(shí)大腦皮層放射性活性％ID/g為2.26±0.29。腦內(nèi)各區(qū)域的攝取在注射后15-25分鐘達(dá)到穩(wěn)態(tài)。皮層的平均％ID/g大于小腦,兩者

5、比值范圍為1.13-2.08。60分鐘時(shí)小腦、腦干和皮層的％ID/g與其最高峰攝取的％ID/g相比分別下降了77％、8096和40％,皮層放射活清除最慢。結(jié)論:[11C]MP4A血中清除迅速。腦中各區(qū)域攝取在短時(shí)達(dá)到穩(wěn)態(tài),提示[11C]MP4A有較好的脂溶性透過(guò)血腦屏障。皮層攝取相對(duì)小腦高,清除慢,因此[11C]MP4A能更好反映皮層乙酰膽堿酯酶活性,適合作為腦乙酰膽堿酯酶活性的PET診斷顯像劑。
　　 第三部分
　　

6、[11C]MP4A的臨床前評(píng)估-PET活體顯像轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠、老齡小鼠及獼猴的腦乙酰膽堿酯酶活性
　　 目的:用腦乙酰膽堿酯酶活性的正電子斷層掃描(PET)診斷顯像劑[11C]4-乙酰氧基-N-甲基哌啶([11C]MP4A)對(duì)轉(zhuǎn)基因癡呆小鼠、老齡小鼠及獼猴進(jìn)行活體PET顯像研究。方法:小鼠于尾靜脈注射[11C]MP4A后,腹腔內(nèi)麻醉小鼠;獼猴經(jīng)一側(cè)肘靜脈麻醉后,于另側(cè)肘靜脈靜脈注射[11C]MP4A。固定試驗(yàn)動(dòng)物于掃描床,進(jìn)行P

7、ET/CT掃描并采集圖像。測(cè)量各感興趣區(qū)域放射性濃度,計(jì)算各感興趣區(qū)域放射總量占全身放射總量的百分比值,用％ID表示,比較兩組小鼠間及獼猴的PET顯像特點(diǎn)。掃描結(jié)束后將小鼠斷頭處死,分離腦(大腦、小腦和腦干),測(cè)定11C計(jì)數(shù)后稱重。計(jì)算放射性攝取率,用％ID/g表示,比較兩組小鼠腦放射性攝取分布特點(diǎn)。結(jié)果:PET掃描圖像顯示兩組小鼠腦放射性聚集均對(duì)稱分布,轉(zhuǎn)基因癡呆鼠腦中放射性聚集較老齡鼠稀疏。轉(zhuǎn)基因小鼠大腦放射性活性平均％ID/g值為