食品酶制劑復配研究用酶的制備.pdf

1、食品酶制劑占世界酶制劑市場份額約30％，是酶制劑中最大的應用行業(yè)，在食品加工業(yè)中起著十分重要的作用。隨著科學的進步和時代的發(fā)展，酶制劑工業(yè)正不斷推出新型酶制劑、復合酶制劑。食品復配酶制劑以其高效、節(jié)能、針對性強、作用效果明顯等優(yōu)點備受使用者推崇，但目前國內復配酶制劑市場上生產的品種有限，還遠遠不能滿足食品工業(yè)的需要，新型、高活力的復合酶制劑仍有待開發(fā)。酶制劑的復配研究需要高純度的單酶做基礎實驗，根據(jù)單酶對底物分子的酶解特性進行復配組合的

2、快速篩選。本課題主要利用蛋白質的分離純化技術和蛋白質的含量與純度檢測技術，從兩種自制復合酶的發(fā)酵液和一種商品酶制劑中制備出了四種高純度的單酶，可作為食品酶制劑復配研究用酶，為酶制劑的復配研究奠定了基礎。
　　從枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中分離了氨肽酶。采用硫酸銨沉淀、Phenyl Sepharose疏水作用層析、Q Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法完成了氨肽酶的高純度單酶制備。經(jīng)過上述

3、四步純化步驟，回收率為15.28％，氨肽酶的比活力達到9066.67 U/mg，純化倍數(shù)為78.26。
　　從虎皮香菇發(fā)酵液中分離了漆酶。采用硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法完成了漆酶的單酶制備。經(jīng)過上述步驟，回收率為48.9％，漆酶的比活力達到7827.33 U/mg，純化倍數(shù)為40.41，達到了SDS-PAGE電泳純。
　　從果膠酶商品酶制劑中分

4、離了聚半乳糖醛酸酶(PG)和果膠酯酶(PE)兩種單酶。采用透析、硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析、Q Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析等方法，使PG較好的分離出來并得以純化，純化后的回收率為48.23％，比活力達到72.93 U/mg，純化倍數(shù)為15.19，達到了SDS-PAGE電泳純;采用透析、硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析和SephacrylS