長雙歧桿菌NCU712高密度培養(yǎng)及菌劑制備技術(shù)研究.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：415615213208南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文長雙歧桿菌NCU712高密度培養(yǎng)及菌劑制備技術(shù)研究長雙歧桿菌NCU712高密度培養(yǎng)及菌劑制備技術(shù)研究StudyontheTechnologyofHighCellDensityCultureAgent’sProducingofBifidobacteriumLongumNCU712杜曼培養(yǎng)單位（院、系）：食品學(xué)院生物工程系指導(dǎo)教師姓名、職稱：熊濤教授指導(dǎo)教師姓

2、名、職稱：彭冬英高級(jí)工程師專業(yè)學(xué)位種類：工程碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱：生物工程論文答辯日期：2015年5月30日答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2015年5月30日摘要II摘要雙歧桿菌被普遍認(rèn)為是人類胃腸道中益生菌群的重要組成部分，對(duì)人類腸道疾病的防治及微生態(tài)平衡的調(diào)節(jié)尤為重要。雙歧桿菌在人體內(nèi)的數(shù)量逐年減少，為保證其益生作用的全面發(fā)揮，雙歧桿菌微生態(tài)制劑及其發(fā)酵食品的研究逐漸成為熱點(diǎn)。雙歧桿菌直投式發(fā)酵劑的研究工作主要解決了雙歧桿菌在體外培養(yǎng)難以得到

3、濃度高、活性好、可直接用于工業(yè)生產(chǎn)的難題，本文主要研究了雙歧桿菌高密度培養(yǎng)技術(shù)及真空冷凍干燥菌粉的制備工藝。本文主要研究內(nèi)容如下：1.長雙歧桿菌NCU712(BifidobacteriumLongumNCU712，后文均簡寫為B.longumNCU712)最佳增殖培養(yǎng)基配方研究。根據(jù)雙歧桿菌NCU712的生長特性，以MRSC培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，利用單因素實(shí)驗(yàn)確定葡萄糖、酵母提取粉、K2PHO4及低聚果糖為最佳成分并確定添加量。利用正交設(shè)計(jì)和均

4、勻設(shè)計(jì)優(yōu)化培養(yǎng)基組分和水平，通過對(duì)比兩種優(yōu)化結(jié)果，最終確定雙歧桿菌NCU712最佳培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖0.5%，酵母提取粉6.4%，K2HPO40.3%，MgSO40.02%，MnSO40.005%，吐溫800.1%，L半胱氨酸0.05%，低聚果糖0.5%。利用增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)雙歧桿菌NCU712，發(fā)酵培養(yǎng)20h，活菌數(shù)達(dá)到1.39109CFUmL。2.B.longumNCU712培養(yǎng)條件及罐上發(fā)酵策略的確定。通過單因素實(shí)驗(yàn)確定罐上發(fā)酵

5、接種量為10%，培養(yǎng)溫度為37℃，以氨水調(diào)節(jié)pH，維持在pH6.0。在最佳培養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，根據(jù)雙歧桿菌NCU712生長曲線的繪制結(jié)果，確定最佳收獲時(shí)間為20h。采用高效液相色譜法研究培養(yǎng)過程中代謝產(chǎn)物變化，產(chǎn)生的有機(jī)酸組分主要為乳酸及乙酸。將化學(xué)中和法運(yùn)用于發(fā)酵罐上培養(yǎng)，發(fā)酵終點(diǎn)菌體濃度為3.8109CFUmL。3.高活性B.longumNCU712菌粉研制關(guān)鍵技術(shù)研究。基于高密度培養(yǎng)技術(shù)的研究，以存活率為比較標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行優(yōu)化，確定保護(hù)劑