枯草芽孢桿菌高密度培養(yǎng)及保護劑的優(yōu)化研究.pdf

1、本課題是以實驗室保存的枯草芽孢桿菌FC96為實驗材料,通過摸索該菌株搖瓶發(fā)酵工藝的技術和數(shù)據(jù),確定適合該菌株發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件;進一步通過對該菌株保護劑的優(yōu)化。保證該菌株在干燥過程中最大的存活率。本課題為枯草芽孢桿菌FC96的發(fā)酵生產和保存等一系列研究奠定了基礎。
　　 本課題對FC96的液體發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化研究。通過單因素篩選試驗,確定適合FC96液體發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳碳源、氮源和無機鹽分別為葡萄糖、牛肉膏和磷酸

2、二氫鉀。然后采用響應面試驗設計優(yōu)化葡萄糖、牛肉膏和磷酸二氫鉀的最佳配比。得出結論:FC96的液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基成分為:葡萄糖12.11g/L、牛肉膏23.31g/L和磷酸二氫鉀2.33g/L。優(yōu)化后的菌數(shù)達到了2.97×109CFU/mL,比初始液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵水平提高了92.8％。
　　 本課題對FC96的搖瓶培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化,得到FC96的最佳接種量為3％、裝液量為100mL/300mL、轉速140r/min、初始

3、pH7.5、最佳培養(yǎng)溫度35℃、最佳培養(yǎng)時間16h。在優(yōu)化后的培養(yǎng)條件下菌數(shù)與初始培養(yǎng)條件相比提高了34.12％。
　　 本課題對干燥過程中所添加的保護劑進行了優(yōu)化,干燥過程中的高溫環(huán)境對菌株的存活產生了非常大的影響,所以在噴霧干燥過程中添加保護劑就顯得尤為重要了。本課題就FC96在干燥過程中所添加的保護劑進行了優(yōu)化。通過單因素篩選試驗確定甘油、吐溫80和脫脂乳粉這三種保護劑對高溫環(huán)境下FC96的存活率有明顯的提高,進一步通過響