枯草芽孢桿菌CCAM080032的益生特性及高密度固態(tài)發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、因抗生素在飼料中的過度使用而導致的耐藥性、毒性殘留等一系列安全性問題越來越引起人們的重視,尋找安全的抗生素替代品迫在眉睫。芽孢桿菌制劑不僅能夠抑制腸道病原菌的生長,提高動物生產(chǎn)性能,而且會形成芽孢,對逆性環(huán)境具有很強的耐受力,因此在飼料業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。
　　 本課題是對實驗室保藏的一株枯草芽孢桿菌CCAM080032展開研究,通過研究其在逆性環(huán)境的體外耐受能力以及產(chǎn)酶情況來評價其益生特性。然后,從培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件等方面對

2、該菌株的固態(tài)發(fā)酵工藝進行優(yōu)化,以期獲得較佳產(chǎn)孢條件,具體研究結(jié)果如下:
　　 1、耐受性試驗表明,枯草芽孢桿菌CCAM080032能夠耐受14％NaCl的高滲壓,人工胃液、人工腸液以及膽鹽對芽孢的存活率幾乎沒有影響,并且具有較強的耐熱能力,當處理溫度≤80℃時,芽孢存活率仍可以維持在90％以上。
　　 2、枯草芽孢桿菌CCAM080032固態(tài)發(fā)酵的物料具有蛋白酶活性、木聚糖酶活性和纖維素酶活性,其中中性蛋白酶活力為107

3、.70 U/g,堿性蛋白酶活力為888.52U/g,木聚糖酶活力為20.28 U/g,纖維素酶活力為8.99 U/g。這三種酶的存在,有助于飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,促進動物的生長,降低飼料成本,提高養(yǎng)殖效益。
　　 3、通過單因素試驗及正交試驗方法,確定了枯草芽孢桿菌CCAM080032的最優(yōu)培養(yǎng)基與最佳培養(yǎng)條件為:稻草粉200 g,麩皮800 g,葡萄糖50 g,胰蛋白胨20 g,NH4NO315 g,KH2PO410 g,

4、H2O1500 g,按5％的比例接種菌齡為17 h的種子液,在37℃培養(yǎng)48 h后,芽孢產(chǎn)量可達到7.90×1010 CFU/g。
　　 4、將發(fā)酵過程起始溫度設(shè)為37℃,同時控制過程中最高溫度不超過45℃,最好保持37℃,并對物料進行適當?shù)姆瓌?可以得到較高的芽孢產(chǎn)量。這一結(jié)論對于枯草芽孢桿菌的實際生產(chǎn)具有指導意義。
　　 5、應(yīng)用轉(zhuǎn)盤發(fā)酵得到的芽孢產(chǎn)量為1.06×1010 CFU/g,應(yīng)用通風發(fā)酵罐得到的芽孢產(chǎn)量為1