植物乳桿菌NCU116富硒培養(yǎng)及菌劑制備技術(shù)研究.pdf

1、硒是機(jī)體不可缺少的微量元素，影響著我們正常的生理與代謝。以微生物作為富硒載體，實(shí)現(xiàn)無機(jī)硒的有機(jī)轉(zhuǎn)化，然后再強(qiáng)化到食品中，這樣既安全又高效。在眾多微生物載體中，植物乳桿菌有著其他微生物不可比擬的益生功能。因此，利用植物乳桿菌進(jìn)行富硒備受學(xué)者們關(guān)注。本文主要對(duì)植物乳桿菌富硒培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行研究及真空冷凍干燥法制備富硒菌劑相關(guān)技術(shù)研究。主要研究內(nèi)容如下：
　　1、L. plantarum NCU116富硒培養(yǎng)基成分研究。采用單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)富硒

2、培養(yǎng)基碳源、氮源、緩沖鹽及硒濃度進(jìn)行篩選。通過正交設(shè)計(jì)，優(yōu)化得出L. plantarum NCU116富硒培養(yǎng)基配方為：葡萄糖2％、牛肉粉：酵母粉（1:2）3%、磷酸氫二鉀0.6%、硫酸鎂0.01%、一水合硫酸錳0.004%、吐溫-800.1%、硒濃度4 ug/mL。利用富硒培養(yǎng)基對(duì)菌體進(jìn)行富硒培養(yǎng)，在到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)，活菌數(shù)可達(dá)4.89×109 CFU/mL，富集率為52.47%。
　　2、L. plantarum NCU116富

3、硒培養(yǎng)條件研究。經(jīng)過單因素實(shí)驗(yàn)確定富硒培養(yǎng)條件為：在對(duì)數(shù)生長前期（4 h、6 h）分兩次添加亞硒酸鈉，接種量為5%，富硒培養(yǎng)溫度為37℃，富硒培養(yǎng)時(shí)間20 h。在富硒培養(yǎng)發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)活菌數(shù)為6.5×109 CFU/mL，富集率達(dá)到66%。富硒培養(yǎng)過程，菌株經(jīng)過2 h延滯期后進(jìn)入對(duì)數(shù)期持續(xù)到第16 h，穩(wěn)定期16-24 h，24 h后逐漸進(jìn)入衰亡期。L. plantarum NCU116屬于同型發(fā)酵益生菌，在富硒培養(yǎng)過程中，其大量消耗葡萄糖

4、，在高硒環(huán)境中可以進(jìn)行正常的生理代謝，積累乳酸。
　　3、高活性富硒L. plantarum NCU116菌劑制備技術(shù)條件研究。復(fù)配保護(hù)劑成分通過正交設(shè)計(jì)確定為：谷氨酸鈉7.5%、海藻糖10%、甘氨酸2.5%，確定最佳冷凍干燥條件為：富硒L. plantarum NCU116發(fā)酵液在4000 rpm條件下離心15 min，預(yù)凍物料厚度為4 mm，在此條件下制備的富硒菌劑中活菌數(shù)為6.2×1011 CFU/mL。在最佳儲(chǔ)藏溫度為-2