產(chǎn)ACE抑制肽保加利亞乳桿菌凍干菌粉制備及應(yīng)用.pdf

1、ACE（Angiotensin Converting Enzyme,血管緊張素轉(zhuǎn)換酶）抑制肽是一類(lèi)具有抑制ACE活性的生物活性肽，具有顯著的降血壓作用，其可通過(guò)乳酸菌發(fā)酵制備。本論文以前期篩選出的ACE抑制肽高產(chǎn)菌株——保加利亞乳桿菌LB6（Lactobacillus bulgaricus LB6，LB6）開(kāi)展直投式凍干菌粉制備及應(yīng)用研究，利用菌體產(chǎn)ACE抑制肽的性能拓展發(fā)酵乳及羊乳的功能性，提高其產(chǎn)品附加值。研究結(jié)果如下：
　　

2、1.增殖抗凍培養(yǎng)基的Plackett-Burman和析因試驗(yàn)結(jié)果表明，乳糖、海藻糖和亮氨酸為影響試驗(yàn)菌株增殖和抗凍的主要影響因子，通過(guò)響應(yīng)面法進(jìn)一步優(yōu)化得到LB6的最佳增殖抗凍培養(yǎng)基為：2.1％乳糖、1.0%大豆蛋白胨、0.9%海藻糖、0.4%酵母粉、0.0012%亮氨酸。經(jīng)驗(yàn)證，活菌數(shù)可達(dá)（7.55±0.27）×108 CFU/mL、凍干存活率可達(dá)（68.2±0.39）%，與預(yù)測(cè)值無(wú)顯著性差異(p＜0.05)，菌粉在-18℃下預(yù)測(cè)保質(zhì)

3、期約為1339天（按保質(zhì)期活菌數(shù)范圍≥1.0×106CFU/g計(jì)）。
　　2.凍干保護(hù)劑（低聚糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)、多聚物類(lèi)、糖醇類(lèi)、蛋白質(zhì)類(lèi)、鹽類(lèi)）的Plackett-Burman和析因試驗(yàn)結(jié)果表明：乳糖、黃原膠和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）為主要影響因子，通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化獲得了LB6的最佳保護(hù)劑為（w/v）：16.4%乳糖、1.1%黃原膠、2.3%PVP、10%低聚果糖、10%低聚木糖、10%低聚半乳糖、0.5% FeSO4，經(jīng)驗(yàn)證，凍干

4、存活率為（81.02±1.46）%、單位菌粉活菌數(shù)為（8.83±0.0067）×1010 CFU/g，與預(yù)測(cè)值無(wú)顯著性差異(p＜0.05)。在上述保護(hù)劑基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)添加24%的脫脂乳后，LB6的凍干存活率為（84.26±0.68）%、單位菌粉活菌數(shù)為（1.14±0.043）×1011CFU/g。
　　3. LB6凍干菌粉和LB6羊奶粉的貯存加速試驗(yàn)（45℃、50℃和55℃貯存）表明，菌粉在不同溫度下失活速率常數(shù)不同，推測(cè)出4℃和2

5、5℃條件下的失活速率常數(shù)分別為k4=2.41×10-4和k25=6.88×10-3，以1×106CFU/g為最低活菌數(shù)限度，預(yù)測(cè)兩溫度下菌粉的保質(zhì)期約為929天和32.5天。LB6羊奶粉在4℃和25℃時(shí)的失活速率常數(shù)分別為 k4=5.64×10-4和k25=1.49×10-2，預(yù)測(cè)兩溫度下保質(zhì)期約為358天和13.5天。
　　4.將LB6凍干菌粉與嗜熱鏈球菌菌粉按1∶1復(fù)配獲得直投式發(fā)酵劑，發(fā)酵試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，直投式發(fā)酵劑在增菌和產(chǎn)肽

6、速率上均優(yōu)于繼代式發(fā)酵劑，并且酸乳的活菌數(shù)在第28天時(shí)仍保持在1×106 CFU/mL以上，ACE抑制率下降至77.71%，pH保持在4.0以上，滴定酸度最大為116.8 oT，冷藏穩(wěn)定性較好。將LB6發(fā)酵劑按比例與羊奶粉混合制備的發(fā)酵型羊奶粉，檢測(cè)表明，其凝乳時(shí)間為5 h左右，pH和滴定酸度分別為4.34和104 oT，ACE抑制率達(dá)到89.87%，總活菌數(shù)達(dá)到2.5×109 CFU/mL，因此，其發(fā)酵性能良好，發(fā)酵型羊奶粉用于制備A