發(fā)酵羊乳產(chǎn)ACE抑制肽乳桿菌的篩選及產(chǎn)肽條件優(yōu)化.pdf

1、當今社會，高血壓已成為一種常見的慢性病，嚴重危害著人們的健康。研究發(fā)現(xiàn)，一些乳桿菌在其發(fā)酵過程中會產(chǎn)生一類具有降血壓功能的多肽——ACE抑制肽，這些多肽安全無毒，并且能夠起到較好的降低血壓的效果。國外已有相關降血壓乳制品問世，而國內尚停留在ACE抑制肽的研究階段，并且使用的發(fā)酵菌和原料也較為單一。陜西是羊乳大省，但羊乳產(chǎn)品卻以附加值較低的羊奶粉為主，本研究使用陜西的優(yōu)勢資源羊乳作為原料乳，對于我國羊乳資源的開發(fā)利用，提高其附加值具有促進

2、作用。
　　 本研究以ACE抑制率為指標，首先從28株益生乳桿菌中篩選得到了4株具有較強產(chǎn)肽能力的菌株，并通過16SrDNA測序法對它們進行了菌種鑒定;接著通過胃腸道模擬試驗對這4株益生乳桿菌進行復篩，得到了產(chǎn)ACE抑制肽能力較強且耐受胃腸道消化的1株益生乳桿菌——保加利亞乳桿菌LB6;之后，以其為試驗菌株，利用單因素試驗和響應面設計分別對LB6發(fā)酵羊乳生產(chǎn)ACE抑制肽的產(chǎn)肽條件和發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，確定了LB6的較適產(chǎn)肽條件

3、和較優(yōu)培養(yǎng)基成分。得到了以下結論:
　　 本課題所研究的28株益生乳桿菌中，有19株乳桿菌的發(fā)酵羊乳具有ACE抑制活性，抑制率最低的為2.27％，最高的為85.52％。其中使用羅伊氏乳桿菌LT33、保加利亞乳桿菌LB6、鼠李糖乳桿菌LR22和乳桿菌L69發(fā)酵的羊乳中ACE抑制率較高。
　　 通過16SrDNA菌種鑒定，LB6、LR22、LT33和L69均屬乳桿菌屬，其中LB6為德氏乳桿菌保加利亞亞種，LR22為鼠李糖乳桿

4、菌，LT33為羅伊氏乳桿菌，乳桿菌L69為植物乳桿菌。
　　 在經(jīng)歷人工胃腸液的消化后，LB6和LT33的發(fā)酵羊乳ACE抑制率明顯高于其他兩株乳桿菌，而LB6發(fā)酵羊乳不論在人工胃液還是人工腸液中，其ACE抑制率均表現(xiàn)出更加穩(wěn)定的特點。并且其發(fā)酵所需時間較短、凝乳效果較好。
　　 試驗表明，一些在牛乳發(fā)酵過程中能夠促進ACE抑制肽產(chǎn)生的發(fā)酵條件，在保加利亞乳桿菌發(fā)酵羊乳的過程中同樣可以促進ACE抑制肽的產(chǎn)生。Placket

5、t-Burman試驗篩選結果表明，在眾多因子中發(fā)酵溫度、乳清粉濃度和乳酸鈣濃度對于發(fā)酵羊乳的ACE抑制率影響較大。采用Box-Behnken試驗得到優(yōu)化后的發(fā)酵條件為:復原羊乳濃度11％，巴氏殺菌時間15min，發(fā)酵溫度為35℃，培養(yǎng)時間12h，乳清粉濃度為0.8％，乳酸鈣濃度為0.5％，接種量5％。驗證結果與試驗結果無顯著性差異，ACE抑制率達到85.88±0.6％，高出對照組10.64％。
　　 通過單因素試驗研究了在羊乳中

6、添加不同物質對于保加利亞乳桿菌LB6生產(chǎn)ACE抑制肽的影響，經(jīng)Plackett-Burman試驗篩選得到了對于發(fā)酵羊乳中ACE抑制率影響較大的三個因子:大豆蛋白胨、葡萄糖和酪蛋白。經(jīng)爬坡和Box-Behnken試驗對LB6產(chǎn)ACE抑制肽培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，其成分為:復原羊乳11％，大豆蛋白胨0.30％、葡萄糖1.15％、酪蛋白0.15％。驗證結果與試驗結果無顯著性差異，ACE抑制率高達92.31±0.5％，LB6活菌數(shù)達到1.04×108