發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的制備工藝研究.pdf

1、蟲草多糖作為冬蟲夏草中重要的活性化合物，具有良好的藥理作用。本論文的目標(biāo)是以發(fā)酵冬蟲夏草濾液作為起始原料，建立合適的提取工藝，從濾液中提取胞外多糖，為工業(yè)化奠定理論基礎(chǔ)。
　　論文建立了利用苯酚-硫酸法快速測(cè)定蟲草多糖含量的方法，最大吸收波長(zhǎng)為486 nm，線性范圍為0-107μg/ml，線性方程為y=0.0105x-0.0133，R2=0.9998，顯色反應(yīng)后生成的化合物在3h內(nèi)穩(wěn)定，該方法6次測(cè)定的吸光值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0

2、1％，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的樣品純度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.44％，6份檢測(cè)樣品的平均回收率為99.26％。
　　采用納膜濃縮，乙醇沉淀法制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外粗多糖，以多糖收率和純度為指標(biāo)考察了各種提取條件對(duì)多糖提取的影響，結(jié)果表明最佳脫淀粉條件為濾液pH＞5，中溫α-淀粉酶（酶活:3000U/g）用量/濾液體積=4μl/L，反應(yīng)溫度:25℃，反應(yīng)時(shí)間:40 min，選用CT151樹脂，當(dāng)多糖濃度2 mg/ml，多糖/樹脂(mg/g)=7

3、2∶1，溫度20℃，時(shí)間60 min時(shí)，脫色和脫蛋白效果最佳。在上述條件下，進(jìn)行了濾液多糖提取的中試實(shí)驗(yàn)，制備的多糖得率1.5 g/L、純度50％以上。
　　采用DEAE瓊脂糖凝膠色譜對(duì)發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖(EPS)進(jìn)行組分分離，通過靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)吸附研究，得到三個(gè)組分:EPS1:單一多糖組分;EPS2:色素和蛋白質(zhì)雜質(zhì)較少的多糖混合組分;EPS3:色素含量較高的多糖混合組分，經(jīng)過分析其重均分子量分別為5642、21811和273