羊肚菌胞外多糖與胞內(nèi)硒多糖抗氧化活性研究.pdf

1、羊肚菌（Morchella esculenta）隸屬于子囊菌亞門（Ascomycotinal），盤菌綱（Discomycetes），盤菌目（Pezizales），羊肚菌科（Morchellaceae），羊肚菌屬（Morchella）。富含多糖、蛋白質(zhì)、微量元素、食用纖維和維生素等生物活性物質(zhì)。羊肚菌多糖是羊肚菌主要的活性成分之一，具有降血脂、抗腫瘤、抗菌、抗疲勞、增強(qiáng)免疫力等多種藥理活性。
　　 硒（Selenium）是人體必需

2、微量元素，缺硒與腫瘤的發(fā)生有關(guān)，硒對(duì)預(yù)防癌癥、克山病、大骨節(jié)病等有重要作用，并具有延緩衰老，提高機(jī)體免疫力的功能。硒多糖兼有多糖和硒二者的活性，其生物活性普遍高于多糖和硒，且更易于機(jī)體吸收和利用。近年來對(duì)多糖和硒活性的研究已經(jīng)較為深入，但將多糖與硒有機(jī)結(jié)合成為硒多糖，國(guó)內(nèi)外的研究尚處于起步階段。
　　 本文以羊肚菌為出發(fā)菌株，通過單因素試驗(yàn)、PB試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)等方法確定了羊肚菌胞外多糖最佳提取條件。通過對(duì)羊肚菌進(jìn)行富硒液體培養(yǎng)

3、，得到了胞內(nèi)硒多糖，初步分析了其抗氧化能力，得到以下結(jié)論：
　　 1、胞外多糖（expolysaccharide，EPS）的最佳提取條件
　　 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果為濃縮溫度84.07℃，沉淀時(shí)間22.19 h，沉淀pH8.44，此條件下羊肚菌胞外多糖的理論值達(dá)5.45g/L?？紤]到操作方便，將最佳提取條件調(diào)整為：濃縮溫度84℃，沉淀時(shí)間22 h，沉淀pH8.4。在此條件下，胞外多糖提取量為5.36 g/L，稍低于理論值5.4

4、5 g/L。
　　 2、EPS的體外抗氧化活性
　　 測(cè)定了EPS對(duì)二苯基苦基苯肼自由基（DPPH）、超氧陰離子自由基（O2-·）和羥自由基（·OH）的清除能力，同時(shí)用普魯士藍(lán)法測(cè)定還原力。結(jié)果表明，EPS有明顯抑制O2-·、·OH和DPPH自由基的作用，并具有一定的還原力，呈現(xiàn)量效關(guān)系。EPS對(duì)O2-·、·OH和的DPPH半數(shù)抑制濃度（EC50）分別為111±4 mg/L、103±4 mg/L和189±8 mg/L。<

5、br>　　 3、Se-MIP和Se-MIP-1的體外抗氧化活性
　　 通過羊肚菌液體富硒培養(yǎng)得到富硒胞內(nèi)多糖，即Se-MIP和Se-MIP-1。Se-MIP和Se-MIP-1分別是羊肚菌破壁醇沉后硒多糖和去蛋白后硒多糖組分。利用原子吸收分光光度法測(cè)得Se-MIP中硒含量為19.78μg/g，Se-MIP-1中硒含量為12.11μg/g。同樣方法，得到羊肚菌的MIP和MIP-1組分，作為抗氧化活性測(cè)定的陽(yáng)性對(duì)照。
　　

6、結(jié)果表明，Se-MIP和Se-MIP-1均有明顯抑制O2-·、·OH和DPPH由基的作用，并具有一定的還原力，呈現(xiàn)量效關(guān)系。Se-MIP和Se-MIP-1對(duì)O2-·的EC50分別為117±6 mg/L和132±7 mg/L。對(duì)·OH的EC50值分別為142±8mg/L和201±8 mg/L。對(duì)DPPH的EC50值分別為131±4 mg/L和136±5mg/L。
　　 4、EPS的體內(nèi)抗氧化活性
　　 通過測(cè)定小鼠心、肝、

7、脾、腎組織和全血的脂質(zhì)過氧化物含量、谷胱甘肽過氧化物酶及超氧化物歧化酶的活性，觀察了EPS對(duì)機(jī)體各組織及全血抗氧化能力的影響。結(jié)果表明，EPS能提高小鼠組織及全血超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，并能降低丙二醛（MDA）的含量，提高了機(jī)體抗活性氧損傷的能力，為防止或減輕脂質(zhì)過氧化損傷提供了試驗(yàn)依據(jù)。
　　 5、Se-MIP和Se-MIP-1的體內(nèi)抗氧化活性
　　 測(cè)定了小鼠血、心、肝、脾、

8、腎組織中MDA含量、SOD和GSH-Px酶活性。結(jié)果表明，Se-MIP可顯著或極顯著地提高SOD和GSH-Px活性，并降低MDA含量；Se-MIP-1可顯著或極顯著降低血清及各組織中MDA含量，但對(duì)SOD和GSH-Px活性無顯著影響。Se-MIP和Se-MIP-1均能有效地提高機(jī)體組織抗氧化能力，防止組織脂質(zhì)的過氧化損傷。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明，羊肚菌胞外多糖和胞內(nèi)硒多糖均具有較強(qiáng)的體內(nèi)和體外抗氧化能力，為羊肚菌多糖的抗氧化機(jī)制及