懸浮培養(yǎng)發(fā)菜胞外多糖生物活性研究.pdf

1、發(fā)菜（Nostoc flagelliforme）是一種能夠在干旱地區(qū)良好生長(zhǎng)的具有很高食用價(jià)值和藥用價(jià)值的陸生藍(lán)藻。目前，野生發(fā)菜資源匱乏，而懸浮培養(yǎng)發(fā)菜既可以提高生長(zhǎng)速度，又不消耗野生資源，是發(fā)菜獲取的重要途徑。懸浮培養(yǎng)發(fā)菜富含多種活性成份，其中發(fā)菜多糖是重要的活性成分之一，被認(rèn)為是一種新型的生物活性多糖。目前研究主要集中在其抗病毒、抗腫瘤等方面的活性，關(guān)于其它方面的生物活性還有待探究。
　　本課題以懸浮培養(yǎng)發(fā)菜為研究對(duì)象，提取

2、發(fā)菜胞外多糖，研究懸浮培養(yǎng)發(fā)菜胞外多糖的體內(nèi)外免疫活性、抑菌性及抗炎性等生物活性，以期為發(fā)菜多糖功能性食品和藥物的研究與開(kāi)發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)得出以下結(jié)果：
　　1.通過(guò)發(fā)菜培養(yǎng)液蒸發(fā)濃縮，脫蛋白，透析等一系列處理，獲得發(fā)菜胞外多糖。單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)得出發(fā)菜胞外多糖最佳提取工藝條件為：乙醇濃度99％，乙醇倍數(shù)4.5倍，濃縮倍數(shù)8倍。
　　2.通過(guò)比較不同培養(yǎng)時(shí)間（0、12、24、36、48、60和72h

3、）和不同濃度（0、25、50、100和200μg/mL）發(fā)菜胞外多糖分別對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化活性的影響，研究發(fā)菜胞外多糖的體外免疫活性。試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同培養(yǎng)時(shí)間和不同濃度的發(fā)菜多糖均能一定程度地提高小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)化能力，并且表現(xiàn)一定的劑量效應(yīng)關(guān)系。表明發(fā)菜多糖具有增強(qiáng)小鼠體外免疫功能的作用。
　　3.通過(guò)小鼠臟器指數(shù)試驗(yàn)，碳粒廓清試驗(yàn)，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)和定量溶血分光光度試驗(yàn)，觀察發(fā)菜胞外多糖對(duì)小鼠體內(nèi)免疫活性的影

4、響。試驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，多糖組小鼠的臟器指數(shù)、碳廓清指數(shù)、吞噬指數(shù)及足跖增厚值都顯著增大，且脾臟 B細(xì)胞分泌抗體能力顯著增強(qiáng)。表明發(fā)菜多糖具有增強(qiáng)小鼠體內(nèi)免疫功能的作用。
　　4.通過(guò)測(cè)濾紙片周圍抑菌圈直徑大小，探究發(fā)菜胞外多糖抑菌性。比較得出發(fā)菜多糖對(duì)大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌及沙門氏菌都有一定的抑制作用，尤其抑制沙門氏菌作用最強(qiáng)，抑制作用隨著多糖濃度的增大而增強(qiáng)；發(fā)菜多糖能夠抑制青霉與紅曲霉，而對(duì)根霉沒(méi)有抑