鼎湖鱗傘菌胞外多糖的理化特性與抗氧化活性研究.pdf

1、鼎湖鱗傘菌(Pholiota dinghuensis Bi)是Pholiota屬中的一個(gè)新種，1985年發(fā)現(xiàn)于我國(guó)廣東省，為中國(guó)特有種?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，真菌多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降膽固醇、降血糖、抗菌和抗病毒、抗過敏和抗炎、保肝護(hù)肝和腸道益生等功能。目前，對(duì)鼎湖鱗傘菌的研究主要側(cè)重于菌絲體多糖的發(fā)酵條件優(yōu)化、分離純化和抗腫瘤活性等方面，而關(guān)于鼎湖鱗傘菌胞外多糖的研究尚未見報(bào)道。因此，本論文旨在對(duì)鼎湖鱗傘菌胞外多糖的分離純化

2、、理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及其抗氧化活性進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1、鼎湖鱗傘菌胞外多糖的分離純化與理化性質(zhì)
　　在28℃、120 rpm，接種量為15％的發(fā)酵條件下，鼎湖鱗傘菌胞外多糖產(chǎn)量為930 mg/L。利用DEAE凝膠陰離子交換柱色譜法對(duì)鼎湖鱗傘菌胞外粗多糖進(jìn)行初步分離，各個(gè)組分分別采用Sephadex G-100凝膠過濾柱色譜法進(jìn)一步純化，得到PDP-1、PDP-2和PDP-3三個(gè)組分。采用苯酚-硫酸法、間羥聯(lián)苯法、

3、考馬斯亮藍(lán)法和氯化鋇-明膠比色法測(cè)定了多糖樣品中的總糖、糖醛酸、蛋白質(zhì)和硫酸基含量。結(jié)果表明鼎湖鱗傘菌胞外粗多糖、PDP-1、PDP-2和PDP-3中，總糖量分別為66.93％、63.20％、68.95％和37.81％;糖醛酸含量分別為0.61％、0.58％、0.94％和1.00％;蛋白質(zhì)含量為0.88％、0.01％、0.24％和3.01％;硫酸基含量為4.67％、10.45％、2.98％和12.11％。在各多糖組分中，PDP-3含有較

4、高的蛋白質(zhì)、糖醛酸和硫酸基含量。
　　通過體外模擬胃腸道消化研究了鼎湖鱗傘菌胞外多糖在腸胃液消化過程中的穩(wěn)定性。結(jié)果表明PDP-1在人工胃液6h后開始被消化分解，PDP-2和PDP-3在胃液中較穩(wěn)定，在腸液中4h開始分解。利用ARSE流變儀研究了鼎湖鱗傘菌胞外多糖的靜態(tài)流變學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明其表觀粘度隨著濃度增大而增大;溫度對(duì)其表觀粘度影響不大;酸性條件下其表觀粘度高于堿性條件;NaCl和CaCl2能增加鼎湖鱗傘菌胞外多糖的表觀粘度

5、，特別是CaCl2對(duì)多糖表觀粘度有較大促進(jìn)作用;蔗糖能顯著提高鼎湖鱗傘菌胞外多糖表觀粘度。
　　2、鼎湖鱗傘菌胞外多糖的結(jié)構(gòu)
　　采用HPGPC法分析鼎湖鱗傘菌胞外多糖三個(gè)純化組分的純度與相對(duì)分子量。發(fā)現(xiàn)PDP-1和PDP-2組分的色譜圖表現(xiàn)為單一峰，峰形對(duì)稱，說明這兩個(gè)組分都是均一組分，純度較高;PDP-3組分峰形不完全對(duì)稱。PDP-1、PDP-2和PDP-3的分子量為2.67×104、1.25×106和1.39×106

6、Da。
　　鼎湖鱗傘菌胞外多糖的PDP-1組分含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖，摩爾比為5.58∶0.46∶0.13∶2.50∶0.81∶0.65∶16.06; PDP-2組分含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、巖藻糖，摩爾比為5.90∶0.44∶0.14∶2.16∶0.42∶13.29;PDP-3組分有甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、巖藻糖，摩爾比為69.92∶3.66∶1.60∶3.

7、81∶18.47。由此可見，PDP-1中含有半乳糖，而在PDP-2和PDP-3中沒有檢測(cè)到;PDP-3中含有葡萄糖醛酸，而PDP-1和PDP-2沒有檢測(cè)到。
　　紅外光譜掃描結(jié)果顯示鼎湖鱗傘菌胞外粗多糖及其各純化組分均具有多糖特征峰，圖譜中的吸收峰表明PDP-2和PDP-3均是酸性多糖，且PDP-3可能是一種多糖和蛋白質(zhì)或肽的復(fù)合物。紫外光譜掃描結(jié)果表明鼎湖鱗傘菌菌絲體粗多糖及其各純化組分均含有一定的蛋白質(zhì)或者肽，PDP-3在28

8、0nm處的吸收峰更為明顯，表明PDP-3的蛋白質(zhì)比其它組分含量更高。
　　3、鼎湖鱗傘菌胞外多糖的抗氧化活性
　　通過測(cè)定鼎湖鱗傘菌胞外多糖清除1，1-二苯基-2-苦肼基自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基能力、金屬離子螯合能力和鐵離子還原能力，評(píng)價(jià)了鼎湖鱗傘菌胞外粗多糖及其純化組分(PDP-1、PDP-2和PDP-3)的體外抗氧化活性。結(jié)果表明:PDP-3在大多數(shù)抗氧化評(píng)價(jià)體系中比其它鼎湖鱗傘菌胞外多糖具有更強(qiáng)的抗氧化活性