甘露聚糖肽制劑氨基酸指紋圖譜研究.pdf

1、甘露聚糖肽是從健康人口腔中分離的α-溶血性鏈球菌33#菌株經(jīng)深層培養(yǎng)，提取精制獲得，具有抗腫瘤、促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)等作用，是一種新型的免疫促進(jìn)劑。作為一種新型的抗腫瘤藥物，其產(chǎn)品目前尚未建立一套行之有效的檢測(cè)方法。針對(duì)此問題，本論文從氨基酸角度對(duì)甘露聚糖肽口服液、片劑及膠囊劑進(jìn)行質(zhì)量控制研究，采用柱前衍生高效液相色譜法分別對(duì)來自不同廠家的甘露聚糖肽制劑共10批次水解前后的樣品建立指紋圖譜，可以為有效控制甘露聚糖肽及其制劑的質(zhì)量提供可靠依據(jù)。研

2、究結(jié)果如下:
　　研究了甘露聚糖肽口服液氨基酸指紋圖譜。用異硫氰酸苯酯(PITC)作為衍生試劑，將水解前后樣品進(jìn)行衍生后注入高效液相色譜儀分析，衍生化試劑最佳用量是1mol/L三乙胺的乙腈溶液200μL和0.1mol/L異硫氰酸苯酯的乙腈溶液200μL。色譜條件為:色譜柱:DiamonsilC18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相:A相為乙腈-水(4∶1)，B相為0.1mol/L醋酸鈉-乙腈(93∶7，pH6.4);

3、梯度洗脫;流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):254nm;柱溫:25℃。對(duì)來自3個(gè)廠家共10批次產(chǎn)品進(jìn)行色譜分析，建立甘露聚糖肽口服液指紋圖譜。將色譜圖進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證并建立共有模式，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行相似度計(jì)算，精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD均不大于3％，方法學(xué)考察結(jié)果良好，相似度符合要求。其中，未水解甘露聚糖肽口服液指紋圖譜共有峰11個(gè)，水解后指紋圖譜共有峰11個(gè)，未水解供試品相似度在0.905～0.996之間，

4、水解后供試品相似度在0.91～0.999之間。
　　對(duì)甘露聚糖肽片劑中氨基酸指紋圖譜進(jìn)行了研究。由樣品色譜圖可知未水解甘露聚糖肽片劑指紋圖譜共有峰9個(gè)，水解后其特征峰9個(gè)。通過相似度評(píng)價(jià)軟件分析，可知10批樣品的未水解供試品相似度在0.738～0.999之間，水解后供試品相似度在0.8～0.998之間，相似度基本符合要求，質(zhì)量較穩(wěn)定。
　　針對(duì)甘露聚糖肽膠囊劑中氨基酸成分，分別研究了10批次樣品水解前后指紋圖譜。同樣由所得色