新型信號(hào)放大型DNA分子機(jī)器的研究及應(yīng)用.pdf

1、青島科技大學(xué)碩士學(xué)位論文新型信號(hào)放大型DNA分子機(jī)器的研究及應(yīng)用姓名：房叢叢申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)指導(dǎo)教師：張書圣；張慧20110610器操作lh，可使檢測(cè)DNA的靈敏度增加兩個(gè)數(shù)量級(jí)，在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，檢測(cè)靶DNA的線性范圍是1010～6mol／L—101014moFL，檢測(cè)限可達(dá)28x10J7mol／L(3s)，放大效率更高。同時(shí)，以磁珠為DNA的固相載體，便于循環(huán)反應(yīng)的控制，同時(shí)實(shí)現(xiàn)了信號(hào)DNA從DNA分子機(jī)器本體的輸

2、出。此外，將適體識(shí)別元件與DNA分子機(jī)器相結(jié)合，以三磷酸腺苷(ATP)為模板分子，考察了這種新型DNA分子機(jī)器的性能，并實(shí)現(xiàn)了癌細(xì)胞中ATP的檢測(cè)。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)ATP的線性范圍是20108moFL一20l曠mol／L，檢測(cè)限為4710。9mol／L(3s)。總之，這種新型DNA機(jī)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，可自動(dòng)化運(yùn)行且信號(hào)放大效率高。通過改變DNA序列，更可應(yīng)用到多種適體小分子的檢測(cè)中，具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。三、DNA分子機(jī)器雙循環(huán)放大檢測(cè)D

3、NA構(gòu)建了一種通過雙循環(huán)放大檢測(cè)目標(biāo)DNA的DNA分子機(jī)器。雙循環(huán)工作模式包含鏈斷裂自循環(huán)模式和鏈斷裂交叉循環(huán)模式，這兩種循環(huán)模式均通過兩種不同的內(nèi)切酶協(xié)同來完成。采用生物條碼的CdS納米粒子—DNA探針組裝到DNA分子機(jī)器系統(tǒng)來尋蹤目標(biāo)DNA。當(dāng)目標(biāo)DNA進(jìn)入到系統(tǒng)中，DNA機(jī)器就會(huì)被觸發(fā)，然后自主的進(jìn)行雙循環(huán)工作模式來產(chǎn)生信號(hào)，整個(gè)過程可以根據(jù)需要來很好的控制。信號(hào)的檢出是通過在酸性溶液中溶解CdS納米粒子—DNA探針，然后使用DP

4、ASV方法對(duì)獲得的Cd2進(jìn)行檢測(cè)。Cd2在063V，同時(shí)獲得了相應(yīng)目標(biāo)DNA濃度的對(duì)應(yīng)電信號(hào)，從而達(dá)到檢測(cè)目的。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，檢測(cè)靶DNA的線性范圍是101016mol／L一801014moVL，檢測(cè)限為41x10‘17mol／L(3s)。因此，該DNA分子機(jī)器能夠顯著放大DNA。盡管這種DNA分子機(jī)器有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，但是它能通過簡(jiǎn)單的操作來連續(xù)的執(zhí)行類似機(jī)器的行為，且整個(gè)檢測(cè)過程在室溫下操作30min就可以完成，方法靈敏度高，選擇