綠茶和茶多酚在肉雞體內(nèi)代謝及對血漿蛋白質(zhì)的影響.pdf

1、本試驗選擇108只40日齡肉雞為研究對象，按籠養(yǎng)飼養(yǎng)的方式進行，飼喂500 mg/kg 綠茶(green tea，GT)、300 mg/kg 茶多酚(tea polyphenols，TP)、300mg/kg表沒食子兒茶素沒食子酸酯[(-)-epigallocatechin gallate，EGCG]。利用高效液相色譜(high-performance liquid chromatography，HPLC)、液質(zhì)聯(lián)用(liquid chr

2、omato-graphy in tandem mass spectrometry，LC-MS/MS)和凝膠電泳等方法，分析茶多酚及其代謝產(chǎn)物在雞血和雞糞中的變化，及茶多酚對雞血漿蛋白質(zhì)的影響。經(jīng)分析，結(jié)果如下：
　　 1．經(jīng)比色法和HPLC 方法分析，綠茶粉中總茶多酚的含量為19.17％，其中含2.22 mg/g 沒食子酸(gallic acid，GA)、4.76 mg/g 沒食子兒茶素[(-)-gallocatechin，GC

3、]、22.63 mg/g表沒食子兒茶素[(-)-epigallocatechin，EGC]、17.43 mg/g 兒茶素[(+)-catechin，C]、5.53 mg/g表兒茶素[(-)-epicatechin，EC]、53.52 mg/g EGCG、76 mg/g 沒食子兒茶素沒食子酸酯[(-)-gallocatechin gallate，GCG]，18.41 mg/g表兒茶素沒食子酸酯[(-)-epicatechin gallat

4、e，ECG]。
　　 2．通過LC-MS/MS分析，在血漿中，灌喂綠茶組共鑒定出：焦性沒食子酸(Pyrogallol acid，PA)、GC、(-)-5-(3',4’-二羥基苯基)-γ-戊內(nèi)酯[(-)-5-(3',4’-dihydroxyphenyl)-γ-valerolactone，M6]、C、GCG、O-methyl-gallocatechin-O-glucuronides (O-Me-GC-O-GlcUA)、Epicate

5、chin-glucuronides+H+（EC-GlcUA+H+)等7 種產(chǎn)物；灌喂TP組共鑒定出：PA、GC、M6、C、EGCG、O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+等7 種產(chǎn)物；灌喂EGCG組共鑒定出：EGCG、GCG、O-Me-GC-O-GlcUA等3 種產(chǎn)物。在雞糞中，灌喂綠茶組共鑒定出：GA、O-methyl-catechin-O-sulphates (O-Me-C-O-S)、O-methyl-galloca

6、techin-O-sulphates(O-Me-GC-O-S)、EGCG、GCG、ECG、O-Mel-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+等8 種產(chǎn)物；灌喂TP組共鑒定出：GA、O-Me-C-O-S、O-Me-GC-O-S、EGCG、GCG、ECG等6 種產(chǎn)物；灌喂EGCG組共鑒定出：O-Me-C-O-S、EGCG、GCG、ECG等4 種產(chǎn)物。雞血中主要是甲基化和葡萄糖酸化衍生物，而雞糞中既有甲基化、葡萄糖酸化又有硫酸化衍生物。

7、
　　 3．經(jīng)HPLC分析。在雞血中，灌喂綠茶組游離兒茶素GC、C 給藥4h 時在血中最高濃度分別達到20.21μmol/L、76.99μmol/L，而游離兒茶素EGCG在給藥8h 時最高濃度達到34.28μmol/L；灌喂TP組游離兒茶素GC、C 給藥4h 時血中最高濃度分別40.35μmol/L、17.25μmol/L，游離兒茶素EGCG在給藥4～
　　 8 時，在血漿中已代謝完；灌喂EGCG組，在給藥0～1.5h

8、之間，游離兒茶素EGCG在血漿中分解成GCG，而在4～8h 之間在血漿中已代謝完。灌喂GT組衍生物O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+在給藥4h 時在血液中最高濃度分別為1.13μmol/L、1.95μmol/L；灌喂TP組衍生物O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+在給藥4h 時最高濃度分別達到1.71μmol/L、1.08μmol/L。對灌喂EGCG組，O-Me-GC-O-GlcUA在給藥4h 濃度

9、最大。灌喂GT組裂解物PA在給藥4h 時在血中的濃度達到最大，M6在給藥8h 時濃度達到最大。灌喂TP組PA在給藥4h時在血液中濃度達到最大，M6在給藥0~1.5h 時未檢出。灌喂EGCG組0~8h 試驗期間未檢測到裂解物。
　　 4.雞糞經(jīng)HPLC分析。GA、EGCG、GCG、ECG在灌喂綠茶組和茶多酚組等4 種游離兒茶素都在4h 時排泄量最大；灌喂EGCG組游離兒茶素EGCG、ECG在給藥4 時排泄量最大。GT組糞樣中衍生物

10、O-Me-GC-O-S 給藥4h 排泄量最大，O-Me-C-O-S、O-Me-GC-O-GlcUA 給藥1.5~4 時內(nèi)全部排泄，EC-GlcUA+H+在給藥4~8h 內(nèi)排泄完；TP組糞樣中衍生物O-Me-GC-O-S在給藥4h 排泄量最大；EGCG組糞樣中在給藥0~8h 之間僅檢測到1 種兒茶素代謝物：O-Me-C-O-S，且在給藥4h 時排泄量最大。
　　 5.綠茶和茶多酚在1.5h 內(nèi)均可以提高雞血血漿總蛋白含量，其中以T

11、P的作用最為明顯。當飼喂后，時間超過4h，與對照組相比，GT組血漿總蛋白含量減少，TP組和EGCG組血漿蛋白含量顯著提高。給藥4-8h 內(nèi)，與對照組相比，GT組和EGCG組血漿總蛋白含量顯著降低，茶多酚對血漿總蛋白含量顯著提高。
　　 6.灌喂1.5h后，TP 可使分子量為67.5kd的蛋白帶加深，而EGCG 導致分子量為107.1kd 蛋白帶消失；灌喂4h后，GT 可使分子量為58.9kd的蛋白帶明顯加深，EGCG 導致該蛋白