膽色素原脫氨酶的性質(zhì)及其與大蒜綠變的關(guān)系.pdf

1、本試驗以邳州大蒜鱗莖為研究對象，研究了膽色素原(PBG)含量、膽色素原脫氨酶(PBGD)活性和綠變強(qiáng)度在不同貯藏條件下隨大蒜貯藏時間變化的規(guī)律，探究了PBG和PBGD與大蒜綠變的關(guān)系。利用DEAE-Sepharose FF離子交換層析、PhenylSepharose CL-4B疏水作用層析和Sephadex G-200凝膠層析等方法對PBGD進(jìn)行了分離純化，并研究了PBGD的酶動力學(xué)性質(zhì)及其影響因素。實驗還探究了茶葉提取物、洋蔥汁以及銀

2、杏葉提取物對大蒜綠變的影響，以期找到控制大蒜綠變的具體措施。主要研究結(jié)果如下:
　　1.以10天為間隔測定了大蒜在4℃和室溫貯藏條件下的綠變強(qiáng)度、大蒜中PBG含量以及PBGD活性隨時間的變化規(guī)律。結(jié)果顯示:在貯藏前期，4℃和室溫條件下綠變強(qiáng)度總的趨勢在不斷增強(qiáng)，且4℃貯藏條件下的綠變強(qiáng)度增長趨勢明顯，室溫條件下增長趨勢緩慢;貯藏后期由于積累的營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，4℃和室溫條件下的綠變強(qiáng)度均有下降的趨勢。比較相同貯藏時間后的4℃和室溫下

3、大蒜的綠變強(qiáng)度，前者始終大于后者;PBG含量隨時間的變化趨勢，與相同條件下綠變強(qiáng)度的變化趨勢相同，由此可推出，PBG含量與綠變強(qiáng)度有相關(guān)性;PBGD活性測定結(jié)果與PBG含量測定實驗結(jié)果一致，說明PBGD活性與大蒜綠變強(qiáng)度有相關(guān)性，PBGD活性越大，則PBG含量越低，綠變強(qiáng)度越小。
　　2.利用DEAE-Sepharose FF離子交換層析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水作用層析和Sephadex G-200凝膠層

4、析等方法對PBGD進(jìn)行了分離純化，并研究了酶的動力學(xué)特征，包括溫度、pH、底物濃度、金屬離子對酶活的影響，及米氏常數(shù)的測定。結(jié)果顯示:PBGD的最適溫度為37℃，最適pH為8.0，所測金屬離子中Al3+對PBGD有最好的激活作用，K+和Na+對PBGD的活性沒有影響。采用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法，得出PBGD的最大反應(yīng)速度Vmax為357.1μg/h mg蛋白質(zhì)，米氏常數(shù)Km為0.68μg/mL。
　　3.實驗探