SSAO介導的氧化脫氨反應對3T3-L1脂肪細胞的氧化應激作用.pdf

1、背景：
　　隨著社會經濟的發(fā)展，人民生活水平逐漸提高，生活方式和飲食結構上的變化，加之運動的減少使得越來越多人有肥胖癥，在全球范圍內肥胖人口的比例日益增加。大量的研究發(fā)現肥胖與胰島素抵抗、糖尿病及心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展有密切的關系，是許多代謝性疾病的共同危險因素。
　　脂肪組織是一個重要的內分泌器官，其能分泌多種細胞因子。研究發(fā)現肥胖患者體內常處于氧化應激狀態(tài)，脂肪組織中過多產生的活性氧分子可引起多種細胞因子表達異常，從而影

2、響機體代謝，參與或引發(fā)肥胖相關的代謝或心血管疾病，及并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。因此，探討脂肪細胞氧化應激的產生因素具有科學意義。
　　氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）是一類催化胺類化合物氧化脫氨的酶?？纱呋浞磻孜锶绮奉惢衔?，產生相應的醛、過氧化氫及氨。有報道體內存在的甲胺，經SSAO催化生成的甲醛和過氧化氫可通過協同增強氧化應激，造成血管內皮細胞損傷。SSAO在成熟脂肪細胞中大量存在，且與細胞的分化程度有關。目前研究認為，SSA

3、O在脂肪細胞中可參與葡萄糖的轉運，具有類胰島素的作用。但其在脂肪細胞中的確切的病理生理功能仍不甚清楚。由于成熟脂肪細胞高表達SSAO，而體內同時存在內源性底物（甲胺，氨基丙酮等），因此，我們猜測SSAO可能參與了脂肪細胞的氧化應激。本文以3T3-L1脂肪細胞為模型，以甲胺、苯甲胺為底物探討SSAO在脂肪細胞中的病理生理意義。
　　目的：
　　觀察氨基脲敏感型胺氧化酶催化其底物甲胺（MA）、苯甲胺（BZA）的氧化脫氨反應對成熟

4、3T3-L1脂肪細胞的氧化應激作用。
　　方法：
　　3T3-L1前脂肪細胞誘導分化為成熟脂肪細胞；高效液相色譜法檢測不同分化天數下細胞SSAO活性的變化；MTT法檢測不同濃度的MA或BZA對細胞活力的影響；熒光探針的方法檢測細胞在底物作用下產生的活性氧；以0.5 mmol/L MA或BZA處理成熟脂肪細胞或未經誘導分化的前脂肪細胞4 h，觀察細胞產生的甲醛（FA）、苯甲醛（BZ）、脂質過氧化指標丙二醛（MDA）、總超氧化物

5、岐化酶（T-SOD）和谷胱甘肽（GSH）的變化。
　　結果：
　　SSAO活性隨細胞分化天數的增加而增加，并于第8 d達到高峰；0.1~1 mmol/LMA或BZA作用細胞4 h對細胞活力無顯著影響（P>0.05）；在成熟脂肪細胞中，0.5 mmol/L MA或BZA孵育后，細胞產生的活性氧增高，約為陰性對照組的3到4倍，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；MDA的含量增加，而T-SOD活性、GSH濃度降低，與陰性對照組相比，