SSAO介導(dǎo)的氧化脫氨反應(yīng)對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞的氧化應(yīng)激作用.pdf

1、背景：
　　隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人民生活水平逐漸提高，生活方式和飲食結(jié)構(gòu)上的變化，加之運(yùn)動(dòng)的減少使得越來(lái)越多人有肥胖癥，在全球范圍內(nèi)肥胖人口的比例日益增加。大量的研究發(fā)現(xiàn)肥胖與胰島素抵抗、糖尿病及心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系，是許多代謝性疾病的共同危險(xiǎn)因素。
　　脂肪組織是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官，其能分泌多種細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)肥胖患者體內(nèi)常處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，脂肪組織中過(guò)多產(chǎn)生的活性氧分子可引起多種細(xì)胞因子表達(dá)異常，從而影

2、響機(jī)體代謝，參與或引發(fā)肥胖相關(guān)的代謝或心血管疾病，及并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。因此，探討脂肪細(xì)胞氧化應(yīng)激的產(chǎn)生因素具有科學(xué)意義。
　　氨基脲敏感型胺氧化酶（SSAO）是一類催化胺類化合物氧化脫氨的酶?？纱呋浞磻?yīng)底物如伯胺類化合物，產(chǎn)生相應(yīng)的醛、過(guò)氧化氫及氨。有報(bào)道體內(nèi)存在的甲胺，經(jīng)SSAO催化生成的甲醛和過(guò)氧化氫可通過(guò)協(xié)同增強(qiáng)氧化應(yīng)激，造成血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。SSAO在成熟脂肪細(xì)胞中大量存在，且與細(xì)胞的分化程度有關(guān)。目前研究認(rèn)為，SSA

3、O在脂肪細(xì)胞中可參與葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)，具有類胰島素的作用。但其在脂肪細(xì)胞中的確切的病理生理功能仍不甚清楚。由于成熟脂肪細(xì)胞高表達(dá)SSAO，而體內(nèi)同時(shí)存在內(nèi)源性底物（甲胺，氨基丙酮等），因此，我們猜測(cè)SSAO可能參與了脂肪細(xì)胞的氧化應(yīng)激。本文以3T3-L1脂肪細(xì)胞為模型，以甲胺、苯甲胺為底物探討SSAO在脂肪細(xì)胞中的病理生理意義。
　　目的：
　　觀察氨基脲敏感型胺氧化酶催化其底物甲胺（MA）、苯甲胺（BZA）的氧化脫氨反應(yīng)對(duì)成熟

4、3T3-L1脂肪細(xì)胞的氧化應(yīng)激作用。
　　方法：
　　3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞；高效液相色譜法檢測(cè)不同分化天數(shù)下細(xì)胞SSAO活性的變化；MTT法檢測(cè)不同濃度的MA或BZA對(duì)細(xì)胞活力的影響；熒光探針的方法檢測(cè)細(xì)胞在底物作用下產(chǎn)生的活性氧；以0.5 mmol/L MA或BZA處理成熟脂肪細(xì)胞或未經(jīng)誘導(dǎo)分化的前脂肪細(xì)胞4 h，觀察細(xì)胞產(chǎn)生的甲醛（FA）、苯甲醛（BZ）、脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)丙二醛（MDA）、總超氧化物

5、岐化酶（T-SOD）和谷胱甘肽（GSH）的變化。
　　結(jié)果：
　　SSAO活性隨細(xì)胞分化天數(shù)的增加而增加，并于第8 d達(dá)到高峰；0.1~1 mmol/LMA或BZA作用細(xì)胞4 h對(duì)細(xì)胞活力無(wú)顯著影響（P>0.05）；在成熟脂肪細(xì)胞中，0.5 mmol/L MA或BZA孵育后，細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧增高，約為陰性對(duì)照組的3到4倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；MDA的含量增加，而T-SOD活性、GSH濃度降低，與陰性對(duì)照組相比，