羧基化二氧化硅納米粒子的制備及其對酶及輔酶固定化的研究.pdf

1、本論文系統(tǒng)研究了羧基化二氧化硅納米粒的制備過程及其在固定化木瓜蛋白酶（EC:3.4.22.2，木瓜酶）及輔酶NAD+方面的應(yīng)用。首先采用兩步化學(xué)改性（烷基化、羧基化）制備了活性二氧化硅納米粒載體。通過對載體制備條件的優(yōu)化，得出最佳制備條件，結(jié)果顯示，硅烷與納米粒用量為1.8ml/g納米粒時，氨基化含量達(dá)到最大，戊二酸酐添加比例為2.5g/g納米粒時，反應(yīng)3h即可達(dá)到載體的最大羧基化。采用熱重、傅里葉紅外光譜等手段對羧基化二氧化硅納米粒載

2、體進(jìn)行了表征，通過對相關(guān)譜圖的分析表明，二氧化硅納米粒載體實現(xiàn)了氨基化及羧基化。
　　 在促進(jìn)劑碳二亞胺(EDC)脫水作用下，將制備出的羧基化二氧化硅納米粒載體用于木瓜酶的共價固定化。結(jié)果顯示，二氧化硅納米粒載體的固載量為4.96mg酶/g載體且最佳給酶量為10mg/gSiO2，最佳固定化溫度及pH分別為70℃及7.0。
　　 對固定化木瓜酶與游離木瓜酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了比較，并研究了固定化木瓜酶對茶飲料的澄清效果。結(jié)果顯

3、示，與游離酶相比固定化酶的穩(wěn)定性有明顯提高，包括溫度及pH穩(wěn)定性，并且固定化酶對4種常見無機鹽離子及4種常見有機溶劑的耐受性增強。此外，本文將所制備的固定化木瓜蛋白酶用于茶飲料澄清方面具有明顯效果，從結(jié)果中可以看出，茶湯中可溶性蛋白含量由119.39μg/ml下降為86.60μg/ml，氨基酸含量由116.58μg/ml上升到123.45μg/ml，且固定化酶處理后的茶湯透光率隨時間基本不發(fā)生變化。
　　 同樣，基于促進(jìn)劑碳二亞