OAT、OCT、OATP轉(zhuǎn)運(yùn)底物鑒定及非同位素分析方法初探.pdf

1、藥物間相互作用以及藥物-食物間相互作用對于人體的影響已經(jīng)逐漸受到國際學(xué)術(shù)界的關(guān)注。藥物間相互作用以及藥物-食物間相互作用的研究方法有多種,其中一種被廣泛認(rèn)可的是采用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人源轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的細(xì)胞株進(jìn)行體外模擬。
　　本論文是在圍繞轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白功能研究,非同位素定量研究方法建立以及結(jié)合同位素與非同位素定量方法研究藥物間相互作用,篩選確證陽性轉(zhuǎn)運(yùn)底物的思路上開展的,運(yùn)用的體外評價(jià)模型是轉(zhuǎn)染人源轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的S2和HEK293細(xì)胞系。
　　本

2、論文的主要成果和結(jié)論包括確證了7種細(xì)胞系的功能;發(fā)現(xiàn)了3種細(xì)胞系的同位素標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)運(yùn)底物攝入增加的現(xiàn)象,并用轉(zhuǎn)運(yùn)效率進(jìn)行了解釋。構(gòu)建了瑞舒伐他汀在細(xì)胞基質(zhì)中的液質(zhì)分析方法,用該液質(zhì)方法確定了OATP1B1、OATP2B1、OAT3單一表達(dá)細(xì)胞系的功能,并確定了瑞舒伐他汀與OATP1B1以及OATP2B1的親和性關(guān)鍵參數(shù)Km值。提出了將瑞舒伐他汀作為OATP家族的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)運(yùn)底物,應(yīng)用LC/MS/MS進(jìn)行定量的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白體外研究新方法,用以在一

3、定范圍內(nèi)替代傳統(tǒng)的同位素標(biāo)記硫酸雌酮做底物的研究策略。研究了梓醇與肝腎主要吸收型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的親和性關(guān)系,證實(shí)了梓醇與OCT2的親和性良好。并通過藥物間相互作用的研究,發(fā)現(xiàn)梓醇可以促進(jìn)OCT2介導(dǎo)下TEA的吸收,從而推斷其可能是一種新型的OCT2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白促進(jìn)劑。首次研究了肉桂酸、阿魏酸、齊墩果酸、去氧膽酸以及洋薊酸對于OAT1、OAT3、OATP1B1以及OATP2B1的抑制作用,確定了肉桂酸、阿魏酸、去氧膽酸以及洋薊酸以競爭模式抑制OAT