基于調控TLR4-NF-κB信號通路的PTPRO影響動脈粥樣硬化機制及冠心病PCI術后患者氯吡格雷抵抗中醫(yī)舌診研究.pdf

1、目的:受體O型蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphotase Receptor type-O，PTPRO)在炎癥的調控中發(fā)揮重要作用，而炎癥與動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)的發(fā)生發(fā)展密切相關。我們對PTPRO在AS發(fā)生發(fā)展中可能的作用及其機制進行探索。
　　方法:運用氧化型低密度脂蛋白（oxidized Low Density Lipoprotein，ox-LDL）誘導小鼠巨噬細胞

2、(RAW264.7細胞系及實驗中獲取的小鼠原代巨噬細胞)建立AS細胞模型，分析模型細胞凋亡情況、細胞中PTPRO表達情況。通過分別構建的PTPRO過表達和PTPRO基因敲除的AS細胞模型，分析PTPRO對模型細胞白細胞分化抗原36(Cluster ofDifferentiation36，CD36)蛋白表達、細胞內甘油三酯(Triglyceride，TG)和總膽固醇檢測(Total Cholesterol，TC)積聚情況、細胞內丙二醛(M

3、alondialdehyde，MDA)及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)含量變化、凋亡蛋白Caspase3蛋白的表達和細胞凋亡情況的影響。通過PTPRO過表達和PTPRO基因敲除的AS細胞模型，分析對模型細胞Toll樣受體4（Toll-like Receptor4，TLR4）和細胞磷酸化核因子/p65(phospho-NF-κB/p65，p-p65)表達的影響并進而分析同時使用核因子κB(Nuclear

4、 FactorKappa B，NF-κB)信號通路抑制劑時細胞TLR4和p-p65表達情況。
　　結果:ox-LDL誘導小鼠巨噬細胞凋亡過程中，PTPRO表達明顯增加并且呈劑量依賴和時間依賴。PTPRO促進ox-LDL誘導下小鼠巨噬細胞的CD36蛋白表達、促使細胞內脂質沉積增加和細胞內TG和TC積聚、增加細胞內MDA含量、減少細胞內SOD含量并且增加Caspase3蛋白的表達和促進細胞凋亡。PTPRO促進ox-LDL誘導下小鼠巨噬

5、細胞的TLR4和p-p65表達，并且當使用NF-κB信號通路抑制劑時，上調的NF-κB信號通路受到顯著抑制。
　　結論:PTPRO參與了ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡過程。在ox-LDL誘導巨噬細胞源性泡沫細胞形成過程中，PTPRO能夠增加細胞表面清道夫受體CD36的表達而促進細胞脂質的攝取，進而促進泡沫細胞的形成;并且PTPRO通過增強細胞氧化應激，促進細胞凋亡。PTPRO通過調控TLR4/NF-κB信號通路，促進ox-LDL誘