基于磷酸鈣納米顆粒的pH敏感藥物載體的構(gòu)建與初步應(yīng)用.pdf

1、磷酸鈣(CaP)納米粒子具有pH敏感、生物相容性好的優(yōu)點(diǎn),常用做藥物/基因載體。然而按照現(xiàn)有制備方法得到的磷酸鈣納米顆粒具有分散性差、易團(tuán)聚等缺陷。因此,本文針對(duì)上述缺陷,采用微乳液法,探索制備磷酸鈣過程中不同因素的影響,并采用聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)及BSA-PLGA對(duì)磷酸鈣納米顆粒進(jìn)行了改性,具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　(1)CaP納米顆粒的制備與表征:采用微乳液法,通過調(diào)節(jié)不同水油比,反應(yīng)時(shí)間以及反應(yīng)溫度來探索制備磷酸

2、鈣的條件,并采用FTIR,EDX,XRD等一系列方法對(duì)材料進(jìn)行了表征。結(jié)果表明:當(dāng)環(huán)己烷:己醇:Trition體積比為8:4:6,反應(yīng)物濃度為250mM,反應(yīng)時(shí)間為30min時(shí),所得到的磷酸鈣納米顆粒分散較好,粒徑在60~90nm,電位在-16~-8mv;
　　(2)CaP納米顆粒的pH敏感實(shí)驗(yàn):在不同pH條件下離心進(jìn)行宏觀觀察,同時(shí)采用包裹阿霉素的納米載體在不同pH條件下進(jìn)行體外藥物釋放,結(jié)果表明:當(dāng)外界環(huán)境pH為7.4時(shí),藥物

3、釋放量約48％,在pH為5.0的環(huán)境下,藥物釋放量達(dá)到了90%以上,證明了材料的pH敏感性;
　　(3)PLGA對(duì)CaP納米顆粒的改性:通過乳化方法采用PLGA對(duì)CaP納米顆粒進(jìn)行改性,并采用FTIR,TEM等手段對(duì)其進(jìn)行一系列的表征,結(jié)果表明:成功合成了CaP/PLGA的復(fù)合納米顆粒,其粒徑在200 nm左右,并在水中均勻分散,解決了CaP納米顆粒在水中不穩(wěn)定、易聚集的缺陷;
　　(4)CaP以及CaP/PLGA復(fù)合納米顆

4、粒的細(xì)胞毒性以及細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn):采用Hela細(xì)胞和U251細(xì)胞對(duì)材料毒性進(jìn)行試驗(yàn), MTT比色法表明:CaP以及CaP/PLGA均具有較低的細(xì)胞毒性;采用Hela細(xì)胞與包載阿霉素的 CaP以及CaP/PLGA分別進(jìn)行共培養(yǎng),結(jié)果表明:納米載體可以進(jìn)入細(xì)胞并且釋放其包載的阿霉素。
　　(5)雙親性高分子BSA-PLGA對(duì)CaP納米顆粒的改性:通過乳化的方法合成CaP與BSA-PLGA的復(fù)合納米顆粒,并通過TEM對(duì)其形貌、粒徑進(jìn)行觀察。