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文檔簡介
1、DNA復制是細胞的基本功能之一,在生長發(fā)育過程中,染色體必須準確無誤地復制并分配到下一代細胞中。因此,復制過程受到極其嚴格的調(diào)控,任何失控必將導致嚴重的后果,包括發(fā)育異常、遺傳疾病、癌癥等。在復制的研究領(lǐng)域,確定真核生物復制起始點或復制子是一個重要方面。
酵母是一類低等真核生物,既具有類似原核生物的生長特性,又具有一般真核生物的分子生物學和細胞生物學特性,是作為確定研究復制起始位點或者復制子的一個重要材料。酵母III號染色體是
2、最早完成測序的,也是目前研究的最清楚的。自主復制序列ARS(autonomously replicating sequence)是能有效轉(zhuǎn)化酵母并能在細胞內(nèi)自主復制的一段DNA序列,在整合到酵母染色體后,能作為酵母的復制起始位點。
ARS305是釀酒酵母III號染色體上一個高活性的,使用頻率很高的復制子。為了研究其兩側(cè)序列對其活性的影響,本文構(gòu)建了以pRS405為載體,插入不同長度的以ARS305為核心、兩側(cè)序列不同的一系列重
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