基于膠體金和量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)的研究及應(yīng)用.pdf

1、免疫層析技術(shù)因其簡(jiǎn)單快速、低成本、適合現(xiàn)場(chǎng)快速篩選，已成為食品安全中的重要檢測(cè)手段。本文制備了膠體金和量子點(diǎn)兩種探針作為標(biāo)記物，偶聯(lián)抗體，分別研制了呋喃它酮代謝物5-嗎啉甲基-3-氨基-2-惡唑烷酮（AMOZ）膠體金免疫層析試劑條、三聚氰胺膠體金免疫層析試劑條、三聚氰胺量子點(diǎn)免疫層析試劑條，并對(duì)試劑條性能進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容有以下幾個(gè)部分：
　　1.制備直徑18nm左右的膠體金顆粒，將其作為標(biāo)記探針，偶聯(lián)AMOZ單克隆抗體。分別將

2、包被抗原和兔抗鼠IgG在硝酸纖維素膜（NC）上劃線作為檢測(cè)線（T線）和質(zhì)控線（C線），制成免疫層析試劑條。AMOZ免疫層析試劑條的檢測(cè)限為10ng/mL，10min左右顯示結(jié)果。對(duì)飼料、肉類樣品進(jìn)行加標(biāo)，分別用膠體金免疫層析試劑條與酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）檢測(cè)，結(jié)果一致。
　　2.將膠體金作為探針標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體，采用類似方法制備出三聚氰胺免疫層析試劑條，試劑條的檢測(cè)限為10ng/mL，10min左右顯示結(jié)果，試劑條

3、密封放置在4℃150天后取出檢測(cè)，檢測(cè)效果無明顯改變。對(duì)牛奶等樣品進(jìn)行加標(biāo)，分別用膠體金免疫層析試劑條與ELISA檢測(cè)，結(jié)果吻合。
　　3.將巰基丙酸（MPA）作為穩(wěn)定劑，制備水溶性CdTe量子點(diǎn)（QDs）。對(duì)其進(jìn)行包殼，得到核殼結(jié)構(gòu)的CdTe/ZnS QDs。將此QDs純化后，與三聚氰胺抗體偶聯(lián)，制備了量子點(diǎn)-抗體（QDs-Ab）復(fù)合物，優(yōu)化復(fù)合物條件，制備量子點(diǎn)免疫層析試劑條，試劑條檢測(cè)限與三聚氰胺膠體金免疫層析試劑條結(jié)果一致

4、，與10種物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，特異性良好。對(duì)牛奶等樣品進(jìn)行加標(biāo)處理，用量子點(diǎn)免疫層析試劑條和ELISA檢測(cè)對(duì)比，兩者結(jié)果基本一致，相關(guān)性很好。
　　免疫層析技術(shù)因其簡(jiǎn)單、方便、快速、可在線檢測(cè)樣品，成為一種有效的檢測(cè)手段。本論文中，一方面，我們制備了膠體金納米顆粒并建立了檢測(cè)食品和飼料中AMOZ和三聚氰胺的免疫層析分析法，檢測(cè)的靈敏度較高；另一方面，我們成功制備CdTe/ZnS量子點(diǎn)并將其與三聚氰胺抗體交聯(lián)，建立了高靈敏檢測(cè)三聚